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标题: 自体血浆 [打印本页]

作者: 丫头1234 时间: 2015-12-21 08:55 标题: 自体血浆

最近做了一次自体血浆的制备，可是发现放置2天后就出现了浑浊状态，而且之前是有灭活离心的，求大神

作者: chenjxcd 时间: 2015-12-21 10:01

是纤维蛋白析出吧

作者: lgfffancy 时间: 2015-12-21 10:32

回复丫头1234 的帖子8 h! \4 u. y6 b6 k. ?" A

同感，纤维蛋白析出~

作者: guanjun1314 时间: 2015-12-21 10:35

纤维蛋白

作者: weijunning 时间: 2015-12-21 11:02

你是经过57℃水浴灭活后3500rpm高速离心15min 吗？一般这样处理后，不会再出现浑浊的。

作者: 丫头1234 时间: 2015-12-21 13:20

回复 weijunning 的帖子
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我们是56度灭活30min 然后再-20度15min，离心12000g 15min的

作者: 丫头1234 时间: 2015-12-21 13:22

回复 lgfffancy 的帖子/ x1 X F. q) ]- a6 A! D5 H; C- A; F, D

那这样的血浆在后续细胞补液的时候添加需要重新离心处理吗？不离心有什么影响没呀？

作者: gondobar 时间: 2015-12-21 14:46

本帖最后由 gondobar 于 2015-12-21 14:46 编辑
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56度灭活30min，2000~2500离心10min，去下层沉淀，上清4度保存。如有浑浊用时可以在离心，对细胞培养没有影响。

作者: 海南小石 时间: 2015-12-21 16:03

蛋白质析出。
不宜放太久。

作者: 鸵鸵 时间: 2015-12-21 16:09

同感，在灭活离心后，要把干净的血浆转移到新的离心管中放于4℃保存，尽量不要放置太久，如果使用时有析出，则需重新离心后才能使用

作者: momoenn 时间: 2015-12-22 18:09

先做个菌检看看，如果不是污染，可以用细胞筛过滤一下或者在高速离心取上清。其实浑浊的用于细胞培养也没有关系，回输用就要小心一点了

作者: fenlichong 时间: 2015-12-23 11:31

可将加血浆的培养基放于37℃培养箱中培养几天看是否浑浊或异常；用之前可以将加血浆的培养基3000rpm再离一次心。

作者: 小馬 时间: 2015-12-23 11:36

如果没有污染，再次灭活就好了。避免加入培养基出现絮状或凝胶状。特别是营养比较丰富的培养基。如果你用的是takara的培养基白蛋白含量高，营养比较丰富。如果自体血浆灭活不充分偶尔会有这种现象出现，另外自体血浆没必要加太多1%左右就行，个人经验。

作者: zsykdx 时间: 2016-1-5 16:58

56℃灭活30min，高速离心收集上清，再过0.22um滤筛；此外如果放4℃保存的话，不宜放太久

作者: 小刘 时间: 2016-1-6 17:30

一看就是没有离心直接灭活后放置的，经过震荡导致纤维蛋白重新悬浮，所以看起来很浑浊，建议灭活后离心转移到新的离心管中，切记用封口膜封口，避免污染，然后4度存放，常温是不行的

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