干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 红细胞裂解液 [打印本页]

作者: 丫头1234    时间: 2015-12-21 13:32     标题: 红细胞裂解液

在制备单核细胞的时候总是会有些红细胞是存在的,有人说可以用红细胞裂解液来处理,但是我们这边的人却说是不可以的,是因为我们的细胞要回输到病人体内所以不可以使用这样的试剂,各位有什么看法
作者: 杨知涵    时间: 2015-12-21 14:03

病人自己的血制备单核吗?直接回输单核还是用于培养?
作者: 丫头1234    时间: 2015-12-21 14:13

回复 杨知涵 的帖子
# n) Z+ D0 l& v6 w( E  c9 D6 T) b$ |& E6 d8 v" n- F2 J; K
就是病人自己的血样制备的,用于回输到病人体内的
作者: 121qwq    时间: 2015-12-21 15:58

单核怕什么,就是PRP而已
作者: 鸵鸵    时间: 2015-12-21 16:18

红细胞在后期培养过程中是会破碎死掉的,如果不是大量的红细胞存在的话,一般不需要特意用裂解液进行裂解,只是不知道你们细胞培养的周期是多久,红细胞的破碎死亡是要一段时间的
作者: 海南小石    时间: 2015-12-21 16:21

提取这一步用分离液并且离心就可以了,不需要用到红细胞裂解液
, u" j0 _- ~" ^: X4 A0 O
9 E6 i( ]" E% c细胞在后续培养的时候你有一个加液的过程,如果用了红细胞裂解液,你就很难分清楚指示剂的状态,不利于加液的判断。
# s9 @1 N3 u$ G: L( `8 n红细胞裂解后也会产生一些无用的细胞裂解物质,可能会对细胞培养造成影响。
作者: 飞翔的烨    时间: 2015-12-21 18:56

回复 海南小石 的帖子
6 n& Y" p% H, d% N% X$ _+ l# _1 ~$ U$ y/ C' W) T2 Z
正解
作者: 杨知涵    时间: 2015-12-22 08:15

病人自己的血分离后有红细胞也没事,因为是自体的;用于培养的到培养后期红细胞会裂解,就没有了。也可以用裂解液裂解,裂解之后细胞再洗两次。
作者: 丫头1234    时间: 2015-12-22 09:24

回复 鸵鸵 的帖子0 Y9 K, Z/ R# w( T) p

8 m) ]/ K% b5 B5 ~9 Z: B我们培养的是CIK细胞的,回输一次大概是需要13天左右的
作者: 丫头1234    时间: 2015-12-22 09:27

回复 杨知涵 的帖子
! T4 z0 o/ {) V' r* V4 q0 I3 C- Q+ g( v0 e
我也是看到资料上说可以用红细胞裂解液的,可是我们这边的老师却说不可以,但是也没有说出过所以然来,用来红细胞裂解液对培养的CIK细胞有影响吗?而且这属于临床的培养好的细胞到时是要回输到病人体内的
作者: 丫头1234    时间: 2015-12-22 09:29

回复 海南小石 的帖子
4 k  `2 W" _& v- o* }! K7 r0 g
# f5 [) t8 T* i2 _红细胞裂解液不是无色的么?怎么会影响到指示剂呢?
作者: guanjun1314    时间: 2015-12-22 11:21

病人个体差异影响导致有个别红细胞分离时跟单个核细胞粘连洗不净,如果量不多,不用管它,随着培养的时间推移,慢慢会分裂掉的,如果量多,可用生理盐水稀释后再分离一次
作者: 沙漠狐o0    时间: 2015-12-22 13:31

13天左右,不需要使用红细胞裂解液的。
作者: 杨知涵    时间: 2015-12-23 09:59

回复 丫头1234 的帖子
  @/ b) F4 X5 u: @6 n- R& Y3 ^% s  Q% [5 v/ d5 U: h; R
我们在也用红细胞裂解液裂解过,对后续培养没发现有影响。对于继续培养的细胞,红细胞不是特别特别多,不用裂解的。
作者: 丫头1234    时间: 2015-12-23 10:43

回复 杨知涵 的帖子
) J: x9 z) w. f* }7 i& R( l  i. S; z8 G) l6 j# l. x9 }
是呀我也是有看到过有关的信息说可以用红细胞裂解液的,所以当时跟老师谈论说可不可以用时居然一口回绝我说不可以,挺受打击的
作者: 小馬    时间: 2015-12-23 11:25

用细胞分离液分离离心就好了。一点的红细胞无所谓的,分离完不会有太多红细胞在里边的。并且非要裂解的话是没问题的,你完了都要清洗细胞,用培养基洗干净就好了。个人感觉没什么必要,只要分离的时候操作仔细一点,完全可以避免
作者: 丫头1234    时间: 2015-12-23 14:09

回复 小馬 的帖子
" ^7 L4 x% V3 A3 B
) o. S2 a- @2 A哦   我懂了   知道可以不用加,就是老师的那句不可以然后又不说原因,搞得。。。。。艾。。
作者: 丫头1234    时间: 2015-12-25 13:15

回复 121qwq 的帖子
! B1 e, n: n# m3 c& ^; C9 n4 q% J5 ?
& G1 T: Q% o& ~: x! h这?何解呀     刚入门的不太懂
作者: riverhe_87    时间: 2015-12-31 14:15

分离液离心后如果还有红细胞的话,我们一般都不用裂解液,因为随着后续培养及洗的过程,红细胞也会裂解掉,或者减少




欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/) Powered by Discuz! X1.5