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标题: CIK细胞培养第一天，瓶中培养基下面出现了一层凝胶状东西，啥原因？细胞还能长起来吗 [打印本页]
作者: zhanglu8677    时间: 2015-12-25 17:03     标题: CIK细胞培养第一天，瓶中培养基下面出现了一层凝胶状东西，啥原因？细胞还能长起来吗

CIK细胞培养第一天，瓶中培养基下面出现了一层凝胶状东西，啥原因？细胞还能长起来吗？细胞铺瓶时加入了病人自体的灭活血浆，以前也是这样做的，从没出现过这样的情况，这次不知道啥原因？望大家赐教~着急啊
作者: death0270    时间: 2015-12-26 09:49

我们以前也出现过这种现象，加血浆会出现的。怀疑是血浆里的纤维蛋白凝固导致，不加血浆的细胞不会出现这种问题。有几株凝结的细胞在培养了4天后团块消失了，细胞能够继续培养，但也有几株细胞凝结的比较厉害，最后只能扔掉。建议能不加血浆尽量不加，如果出现凝胶现象立刻停止加入血浆，等几天看看团块是否消失。
作者: king8    时间: 2015-12-26 13:59

有没有试过用PRP？
作者: zhanglu8677    时间: 2015-12-26 16:23

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' R( i8 L' X5 a1 U- s/ j你们当时加的血浆也是灭活的吧？后来团块消失的细胞都养起来了吗？可以给患者回输吗？
作者: zhanglu8677    时间: 2015-12-26 16:23

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+ M0 V2 g- S( h  YPRP是什么东西？
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作者: 312473313    时间: 2015-12-27 16:48

估计是血浆的问题，没有灭活彻底
作者: 小猫狸狸    时间: 2015-12-28 08:17

血浆问题的可能性比较大，应该是灭火不彻底
作者: 御剑红尘    时间: 2015-12-28 08:38

我们实验室也遇见过这种情况，细胞只观察，别吹打处理了，培养个2-3天，如果细胞有增殖，就可以继续培养。
作者: hwlightning    时间: 2015-12-28 08:54

血浆的问题，你可以收集起来，离心后重新加入培养基进行培养。
作者: 小馬    时间: 2015-12-28 11:19

血浆灭活问题，灭活不充分。本人做过对比试验，彻底灭活好的跟没灭活好的对比彻底灭活没有凝胶状的，没灭活完全的会有絮状或胶状沉淀。灭活完的时候离心看看血浆是否清亮，沉淀析出量。如果你是偶尔出现这种情况，可能是由于病人个体差异，你把血浆重新彻底灭活一次，问题基本可以解决。血浆很宝贵，应该珍惜利用。并且对于营养成分含白蛋白较高的培养基没有必要加入太多血浆，在1~2%左右即可。
作者: pengxuleo    时间: 2015-12-28 14:53

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5 U0 N2 l6 u- x这个凝胶状物质应该血浆中蛋白和培养基中的成分发生反应凝结的，之前分离细胞的时候使用培养基洗细胞的时候也发生过的。不是普遍现象，与个体有关。发生之后，细胞最好重新收集起来离心，重新培养。血浆不要铺板了，先和培养基混合好，看看有没有凝结，再决定是否使用。
作者: momoenn    时间: 2015-12-29 10:25

灭活不充分。血浆中含有纤维蛋白原，与培养基中的钙离子结合会发生凝固。血浆可以重新灭活一下。细胞底层的凝胶可以去除，再继续养养看，应该还能养起来
作者: zhanglu8677    时间: 2015-12-30 15:53

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6 K& L9 a; c. j& S/ h7 E2 K- E养了四天了，看现在的情况是养起来了，可以给患者回输吗？
作者: zhanglu8677    时间: 2015-12-30 15:57

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血浆灭活时，是56度，30min吗？没灭活好的是什么条件灭的呢？
作者: zhanglu8677    时间: 2015-12-30 15:58

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1 Z% ^/ g. e8 X1 O2 Q" Q细胞长起来的话，可以给患者回输吗？不会有什么问题吧？
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作者: 小刘    时间: 2015-12-30 16:44

病人服用过药物，做好放化疗，影响了血液，只要你离心的参数啥的都没问题，正常培养，5天时检测一下，如果没问题正常回输就行，没影响的
作者: 御剑红尘    时间: 2015-12-31 08:42

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细胞长起来，在回输前需要做质检，没有问题就可以回输。细胞治疗关键还是要控制好质检。
作者: 小馬    时间: 2015-12-31 09:47

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不是条件不好，而是结果不好。你灭完要看一下，并不是指按流程走完了就不管了。这个还是有个体差异，你再重新灭一次，离心时间长点，转速适当高点，都可以，基本就解决问题了。
作者: fenlichong    时间: 2015-12-31 10:04

血浆灭活不彻底，灭活温度或时间不够。
作者: death0270    时间: 2015-12-31 11:07

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细胞还是长的不错的，检测什么的都是合格的。血浆也是灭活的
作者: riverhe_87    时间: 2015-12-31 14:08

应该是血浆灭活的原因，不充分
作者: momoenn    时间: 2016-1-2 14:09

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回输前做好无菌检测，回输时用细胞筛过滤，避免回输袋里有可见异物。
作者: zsykdx    时间: 2016-1-5 15:52

我们之前也试过，估计是血浆没有彻底灭活
作者: quanquan326    时间: 2016-1-12 15:50

zhanglu8677 发表于 2015-12-30 15:53
9 k7 {8 [+ n+ a5 |' f; [( q/ ~9 S回复 momoenn 的帖子
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4 p( Z4 A# ?6 q" C$ e! ?6 ?养了四天了，看现在的情况是养起来了，可以给患者回输吗？

2 k9 m5 f! G+ g( M可以回输，只要相关检测没有问题，一般都是血浆没有灭活完全的原因
作者: zhanglu8677    时间: 2016-1-13 11:15

回复 quanquan326 的帖子9 {/ ]/ b  s, c( Y2 B

+ [* W" M  E2 r% E# V7 L/ R+ s6 C无菌，内毒素什么的都没问题，细胞量也挺多



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