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标题: 大鼠骨髓MSC为什么只那么少 [打印本页]

作者: yiwuya007 时间: 2015-12-28 22:01 标题: 大鼠骨髓MSC为什么只那么少

用4周左右雄性SD大鼠，四肢骨髓冲洗，最近几次做下来，只能种在6孔板的1-2个孔，以前做可以种2-3个100mm的大皿，实在想不出来为什么。冲洗时间太久，细胞死了？双抗的原因？大鼠太小了，骨髓少？
请大家支招，哪里出了问题？

作者: lgfffancy 时间: 2015-12-29 09:04

回复 yiwuya007 的帖子* ~* I% [% b4 w7 _
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其他都有可能，唯一大鼠太小了，骨髓少，这个我不太赞成。如果大鼠是健康的，这个年龄的大鼠骨髓不应该太少。

作者: pengxuleo 时间: 2015-12-29 11:07

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首先，4肢是没有必要的...前肢试验过几次了，都不成功...后肢就足够了$ k& K: n4 Y& U
其次，4周龄大鼠的BMSC分离，差不多1只大鼠，1-2个10cm皿，没有问题的% _. z( m" I2 H' m6 ?- {% @! U
问题，可能是培养基和血清什么的...是不是最近换过，或者分离过程中消毒时间太久了，细胞活性下降了...

作者: yiwuya007 时间: 2015-12-29 17:13

回复 pengxuleo 的帖子- @3 |0 b2 W4 }6 v9 k* }1 U h
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因为没多少贴壁细胞，培养基换了几种，血清用了gibco和hyclone，都这样- s1 G: J% K2 k+ ]8 D4 M/ @, m
消毒，就是整只动物在酒精中泡5-10分钟，分出四肢，PBS洗了很多次

作者: pengxuleo 时间: 2015-12-30 13:36

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培养基和血清都用hyclone 的吧，我们实验室用的这个，还是挺好的

作者: firstaider 时间: 2016-2-3 15:43

用后肢吧，不可能少的

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