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标题: 脂肪干细胞需要红细胞裂解液吗? [打印本页]

作者: jddakui    时间: 2016-1-8 16:14     标题: 脂肪干细胞需要红细胞裂解液吗?

做脂肪干细胞培养,有些血管很难分离,酶消化后 离心底层沉淀是红色,需要红细胞裂解液处理吗?对细胞有没有损伤?
作者: ytumuyangren    时间: 2016-1-8 16:21

我们做的时候,将脂肪组织剪碎后用PBS多洗几次可以减少红细胞的残留,即使有少量的红细胞不会影响脂肪干细胞的增殖的,在后续培养过程中通过换液,消化细胞传代就可以除去掉红细胞。最好不要用红细胞裂解液,再温和的裂解液都会对细胞膜有损伤。
作者: 木头1102    时间: 2016-1-8 16:23

我觉得没有必要,培养一段时间,红细胞就裂解死亡了
作者: yaolinzhang    时间: 2016-1-8 16:27

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- q( S' l" R8 D8 ]- C% K7 p& u2 ^5 G. ]( }$ V
不要反复裂解,裂解一两次,掌握好时间还是可以的
作者: lgfffancy    时间: 2016-1-8 16:44

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+ S6 S8 b$ f5 u7 N7 A+ R0 a$ ]+ N& ?: V& m
不需要用,培养过程中红细胞自动就消失了。
作者: jddakui    时间: 2016-1-8 17:33

回复 ytumuyangren 的帖子+ c* f* d, |" Q2 {! i8 z
) |) ]7 J5 B; W/ n1 {6 {  ]5 c
你们一般原代培养多久?传代后T75铺满,细胞能有多少?: x0 V; ~& a4 y( e: a( d- q

作者: ytumuyangren    时间: 2016-1-10 10:12

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6 ^/ x& W3 ~, B3 y8 g原代一般是8-10天,T75长至80%传代,细胞数目在3-5*10的6。
作者: jddakui    时间: 2016-1-11 10:13

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) e1 M" j6 @& G' ~7 w3 `6 @6 \7 r( u+ K5 T5 U/ y  Q8 j
谢谢
作者: 沙漠狐o0    时间: 2016-3-29 09:28

红细胞裂解液能不用就不用吧。。。$ Y& g" B, D& _) x' f# H$ L. c
换液2次基本上可以去除红细胞了。。。
作者: 淘知路遥    时间: 2016-10-20 09:54

脂肪做之前要清洗几遍至无血丝
作者: woshibotao_01    时间: 2016-10-20 10:59

剪成乳糜状然后加入PBS洗涤过200目滤网多洗几次就干净了
作者: sunyandong    时间: 2016-11-14 19:13

可以加HES沉淀红细胞,离心
作者: tyceric    时间: 2017-3-20 08:40

想学习,但看不了,揪心
作者: 爱学习的青年    时间: 2017-3-21 10:40

红细胞一般不会增殖,在培养换液过程中,红细胞逐渐就被倒掉,留下来的脂肪干细胞不含红细胞




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