干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 脐带干细胞冻存时，用什么样冻存液以及多大冻存密度最好 [打印本页]

作者: fjq729587158 时间: 2016-1-22 18:51 标题: 脐带干细胞冻存时，用什么样冻存液以及多大冻存密度最好

本帖最后由细胞海洋于 2016-1-22 19:48 编辑

脐带干细胞冻存时，用什么样冻存液以及多大冻存密度最好

作者: swtarron 时间: 2016-1-23 21:28

冻存液一般都是DMSO和培养基（培养细胞的培养基），密度的话大概是1ml里面含有2*10的6次方或者3*10的6次方。

作者: fjq729587158 时间: 2016-1-24 20:29

回复 swtarron 的帖子
+ T: m% H( @; ~
DMSO与培养基的比例？

作者: swtarron 时间: 2016-1-25 08:42

回复 fjq729587158 的帖子
* L8 _, U9 v) @, l" y+ h
这个问题貌似有点……，DMSO终浓度为10%即可。

作者: haibara007007 时间: 2016-1-26 14:33

回复 fjq729587158 的帖子
# z$ l: S- N5 g) Y8 R7 \
我们一般dmso加血清1:9配成冻存液，密度一般1.0*106

作者: Albertchen 时间: 2016-1-27 13:06

市面上有专门的那种间充质干细胞的冻存液卖的啦，很方便的，你去找找。

作者: yingfeixiang 时间: 2016-1-27 13:21

DMSO与FBS按1：9就是DMSO终浓度为10%。也有别的配比，浓度1-5*106

作者: 三月桂花香 时间: 2016-1-29 11:42

冻存液就是DMSO了冻存密度一般都是1*106

作者: 枫之叶影 时间: 2016-5-12 16:26

冻存液是DMSO 冻存液的终比例大概在5~10%

作者: henryjia 时间: 2016-5-13 02:42

经典方法：DMSO与FBS按1：9就是DMSO终浓度为10%。浓度1-5*106。

强调一点，一定要控制冷冻速度

作者: 晗晗 时间: 2016-5-16 15:41

DMSO:FBS=1:9,或者可以用培养液的,一定要慢冻速溶

作者: veda327 时间: 2016-5-17 17:18

一般的冻存液即可，生长培养基含有10%的DMSO即可！

作者: Diane0321 时间: 2016-5-17 19:08

冻存液我们一般都用FBS+10%DMSO,不能说是最好的，但应该是比较常用的，密度的话1~3*10的六次就差不多了。

作者: 蚂蚁上树 时间: 2016-5-19 15:28

DMSO:FBS:培养基：1：2：7，密度为1-3*10的六次方左右，密度太低细胞复苏后不容易存活

作者: Ivan0108 时间: 2016-5-31 10:19

干细胞一般是DMSO：完全培养基=1:9

作者: 18627000462 时间: 2016-5-31 13:17

我们用DMSO和培养基1：9的比列配置，细胞密度为2*10^7/ml，用程序降温盒直接放入-80冻存或者4度两小时-20两小时再转-80，24小时候转液氮，如果使用平凡的话，就-80冻存就行了

作者: yangweirenhao 时间: 2016-6-5 10:03

10%的DMSO,以培养基稀释，量是1ml冻存管1X10的六次方到2X10的七次方都没问题的

作者: shuimiao327 时间: 2016-6-27 11:05

冻存液为FBS加10%DMSO,冻存密度是每毫升1~2*10^6

作者: gondobar 时间: 2016-6-27 16:11

回复 haibara007007 的帖子! w5 ^, k; s4 m) ?" v* @

血清好贵的，1：9用不起。。。

作者: anzhida0823 时间: 2016-7-1 09:56

回复 fjq729587158 的帖子0 N; Q; S3 A- l: N4 A% t( F+ d5 B

我们脐带冻存2*10的7次方/ml左右，最近深圳发布的文件人类血液来源免疫细胞库建设中规定免疫细胞冻存密度是8*10的6次方至1*10的7次方/mL，应该有所借鉴的意义

作者: saliai2016 时间: 2016-7-1 10:08

dmso加FBS1:9配成冻存液，密度一般1-5*106

作者: sithbj 时间: 2016-7-3 13:54

好像全部是FBS或血清的效果并不好。有专门文章研究。我们用人血白蛋白5毫升，培养液4毫升，加1毫升DMSO。新鲜配。

作者: fjq729587158 时间: 2016-7-4 20:11

回复 anzhida0823 的帖子" ]* n9 x. c4 Y/ b

那你们冻存液是不是特定的吗？

作者: anzhida0823 时间: 2016-7-18 10:09

回复 fjq729587158 的帖子

不是的，用的是血浆+10%DMSO

作者: 544795014 时间: 2016-7-19 10:36

我们通常冻存密度是1~3*10^6 cell/ml，血清：DMSO=9:1

作者: ielisa 时间: 2018-1-13 13:20

回复 henryjia 的帖子; N) Z7 l9 A# u) H" Q% `- V* L
. V/ L- u* d" V' r: {% S
冻存速度一般是多少啊？

作者: ielisa 时间: 2018-1-13 13:23

你们怎么都用浓度那么高的FBS啊，这样操作，贵不说，效果不见得好吧，还是推荐DMSO是10%，FBS在20%或30%，剩下的是基础培养基。
浓度的话，10的6次方，7次方都可以的！

作者: niliu730323143 时间: 2018-1-16 13:05

最好是使用无血清冻存液。

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)