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标题:
CD3抗体包被vs直接添加
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作者:
醉心科研
时间:
2016-2-15 11:09
标题:
CD3抗体包被vs直接添加
关于CD3单抗是包被好还是直接添加好，论坛里已讨论过好几个帖，这里不涉及这个问题。
G2 I/ g' p, E4 z
就是有一点不明白，包被是接种之前就包被好了，而直接添加是伽马诱导24h之后加的。那么这两个时间点不一样啊，哪个时间添加更好呢？
作者:
繁华落尽
时间:
2016-2-15 11:37
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醉心科研
的帖子
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这个实验我们做过，CD3正常包被的时候都是在接种之前包被，时间大概为接种前12h，包被的效果和不包被的效果没什么区别，唯一就是包被后的细胞，前期易贴壁生长.另外也可以采纳用血浆包被或者是纤维连接蛋白FN
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作者:
Sarge
时间:
2016-2-15 11:46
效果是差不多的，包被太费抗体
作者:
醉心科研
时间:
2016-2-15 14:06
可能我问的不够清楚。我关心的是加入时间的问题。
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按照包被的时间算，相当于在接种0h时加入的anti-CD3，而一般加都是24h后再加。这样算来，是不是直接在接种时加入溶解好的anti-CD3也行呢？
作者:
zerollx
时间:
2016-2-15 16:59
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Sarge
的帖子
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添加可溶性抗体CD3和CD28的浓度一般是多少啊
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作者:
Sarge
时间:
2016-2-15 17:30
浓度得自己摸条件，不同的品牌和培养体系用的浓度都是不一样的
作者:
Sarge
时间:
2016-2-15 17:31
一般是在50-100ng/ml
作者:
Sarge
时间:
2016-2-15 17:35
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zerollx
的帖子
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浓度得自己摸条件，不同的品牌和培养体系用的浓度都是不一样的
作者:
a276038921
时间:
2016-2-16 08:45
感觉包被的细胞后期生长的要比直接添加的好，而且不容易结团
作者:
baoweih
时间:
2016-2-17 10:33
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醉心科研
的帖子
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可以接种时加配好的CD3培养基，两天后再加含IL-2的培养基，这种方法细胞没有包被的生长得快
作者:
zmfang555
时间:
2016-2-17 11:26
包被的由于CD3有效浓度大，细胞获得的刺激较强，前期生长较快，但后期生长较慢，如添加CD28效果更明显。
作者:
清如许231
时间:
2016-2-24 15:28
关于激活有很多说法，提前包被，或者后期不加，还有二次激活一说，但都能达到激活目的就可以了，目前是这样，但是不能理解为什么只加CD3不加CD28也能激活，对于T细胞活化，不是说需要双信号么？CD3/TCR CD28/B7，如果T细胞缺乏共刺激信号会T细胞无能？？求解释
作者:
醉心科研
时间:
2016-2-25 09:16
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清如许231
的帖子
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+ V4 m: N: o4 H: b: r
我做过一次28加与不加的对比，我的结果是扩增效果没有差异，不知道其他人什么结果？
作者:
清如许231
时间:
2016-2-25 13:14
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醉心科研
的帖子
. r2 w6 D) P Z( Q4 I
+ J& H# T) e! q: k. B
我也尝试过不加CD28，但是理论依据何在？
作者:
zmfang555
时间:
2016-2-25 14:51
我们做过这个实验，直接分离细胞后加CD3和24小时添加，效果没有什么区别，但是不要超过24小时，往后就有影响了。
作者:
momoenn
时间:
2016-2-27 14:56
包被的细胞活化快，前期增殖较快。但从整个培养过程看，没有明显的优势，而且还需要比较大的量
作者:
biluolinyu
时间:
2016-2-29 13:41
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醉心科研
的帖子
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5 j8 w6 A$ D1 D1 R: t" E
请问一下，您CD28使用量与CD3相同么
作者:
醉心科研
时间:
2016-2-29 14:05
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biluolinyu
的帖子
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9 l$ f0 c+ ^, {+ w9 S8 |5 P6 l
是的，我查到的资源都是说添加相同的量。
% x& E. \( }$ k. j! ^
你也试试吧，如果有结果了欢迎来讨论。
作者:
biluolinyu
时间:
2016-3-1 08:43
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醉心科研
的帖子
4 K: B3 e+ y% @3 T" L* W* s( L
8 h5 P' g% S' R; J. D) [
嗯嗯，谢谢楼楼
作者:
xiaoxiaodeji
时间:
2016-3-9 11:18
问下，是怎样包被呢
作者:
我是传奇
时间:
2016-3-18 11:17
包被，固定相对于细胞的刺激效果要大于游离相。
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