干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站
标题:
胰酶消化问题
[打印本页]
作者:
1195963542
时间:
2016-3-2 13:21
标题:
胰酶消化问题
胰酶消化时间过长，对以后细胞培养有什么影响？细胞会死么
作者:
yooung
时间:
2016-3-2 14:07
胰酶分解细胞表面膜蛋白，消化时间过长，估计严重点会消死细胞，也可能导致以后细胞培养时细胞贴壁不紧。
作者:
baby00000003
时间:
2016-3-2 15:14
试试看trypLE吧，据说是细胞在那里面泡上个半天都不会死
作者:
1195963542
时间:
2016-3-2 16:46
回复
baby00000003
的帖子
; j3 J/ n! f; C$ N0 e* S! Q0 ^
! T6 O1 Q- u+ m/ T) ?! |- i: G
终止原理是什么呢？ 可以直接用培养基终止消化？
作者:
baby00000003
时间:
2016-3-2 16:47
回复
1195963542
的帖子
L; V `3 b: D
. X0 i/ a5 Y0 T; u' }# A
无需终止，离心洗干净就ok了.....
作者:
1195963542
时间:
2016-3-2 16:55
回复
baby00000003
的帖子
- }& Y6 x, A$ d5 s' k ?
% E; g- W- r$ n' ?( r' _
哦 亲 你们用过么 听着这么好呢 呵呵
作者:
baby00000003
时间:
2016-3-2 16:59
回复
1195963542
的帖子
* n" X) v# @8 |) l" m( Z' Z1 T
# d% \/ l# h- o" d
一直在用呀，不过没有故意的把细胞泡那么久过
作者:
1195963542
时间:
2016-3-2 17:02
回复
baby00000003
的帖子
, W' [# M4 N; t5 W' d: j
! K5 n- y) `0 T; p) E- m
你们培养的是什么间充质干细胞呢，浓度是0.125%的么 时间控制在多长时间呢
作者:
tingting2113
时间:
2016-3-3 10:19
回复
1195963542
的帖子
) |, f7 e- l2 N
- f0 }8 s3 z( p! g- h
影响细胞活性和贴壁状态，严重的情况细胞会死亡的。我们消化都是需要终止的，直接用培养基终止消化进程。
作者:
小猪32
时间:
2016-3-3 13:38
回复
1195963542
的帖子
" Y: L' f9 R3 J9 z! O) e5 _7 N! p
# e& K9 x+ [' ^7 u
胰酶消化时间过长会影响细胞贴壁，所以建议消化前将胰酶复温，加入胰酶后，镜检，若细胞皱缩，细胞间出现间隙，即可轻拍培养瓶，细胞会成流沙状滑落，加入完培，吹打即可
作者:
baby00000003
时间:
2016-3-3 18:23
回复
1195963542
的帖子
9 ^$ }1 c$ a- s5 m3 q3 J2 y
. O6 n) [9 Y" f+ {& e% ^- @
脐带来源MSC，这个trypLE没有％浓度，就叫1X
$ |8 s. V$ I7 A; [4 A7 A- n/ Q
网上有详细信息，您了看看去呗～
6 n7 a7 }# T! ~( O$ M2 F. t" F
就跟普通的0.25%一个用法，讲究的放37，其实室温也可以，有个3分钟左右就漂了～
作者:
fjq729587158
时间:
2016-3-3 20:16
胰酶消化时间过长，影响细胞活率
作者:
1195963542
时间:
2016-3-3 21:12
回复
baby00000003
的帖子
; s- z$ i6 a% S. @
, y: @# a8 W1 r0 C! T* j/ T% {
亲 想问问 胰酶消化时看到细胞形态变圆后立即终止消化 还是等待变圆飘起来后 再终止消化呢
作者:
baby00000003
时间:
2016-3-4 08:27
回复
1195963542
的帖子
8 g- t7 @1 o% g3 u H
" s# e+ ?7 _/ W/ F
都可以呀～这个酶的优势就是不讲究
( |( s1 f& [9 j' F- F8 t
一次处理10个8个瓶子的时候也不用担心手慢
作者:
biluolinyu
时间:
2016-3-4 13:15
triple消化细胞后，直接再加入一定体积的液体，比如盐水，比如本来要弃掉的就培养基，将triple稀释就可以终止消化。
作者:
tojones
时间:
2016-3-4 14:14
胰酶消化时间过长会使细胞干性降低，细胞老化，CD11b表达量上升。
作者:
mex0206
时间:
2016-3-14 08:27
会的
作者:
yuyouyou812
时间:
2016-3-16 10:10
如果后期传代比较多的话，细胞量比较大，我们一般就用培养上清终止，直接用培养基比较浪费
作者:
happy_noel
时间:
2016-3-18 08:55
胰酶消化时间不宜过长，控制在5min内即可，消化时间过长，消化时细胞密度过高，细胞会成团，计数不准确且影响细胞生长状态。
作者:
撸大师撸大师
时间:
2016-6-3 14:56
TrypLE这种酶细胞泡大半天都没问题。
作者:
晗晗
时间:
2016-6-3 15:01
消化时间长会影响细胞活率,如果时间特别长细胞就会死啦
作者:
Natalie
时间:
2016-6-3 15:24
胰酶可使细胞间的蛋白质水解从而达到细胞离散的目的
作者:
ccfc
时间:
2016-11-7 13:23
胰酶消化时间过长会影响细胞活性和贴壁状态，导致细胞老化，一般会提前预热胰酶，在细胞皱缩变亮以及部分细胞漂浮后用中和液终止消化
欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)
Powered by Discuz! X1.5
