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求救：冻存后间充质干细胞不贴壁也不是死细胞
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作者:
chslyx
时间:
2016-3-14 18:22
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求救：冻存后间充质干细胞不贴壁也不是死细胞
年前收了一些干细胞，用90%血清+10%DMSO的-80冰箱冻存了一个月，取出后清洗三遍，之后就是细胞就是不贴壁也不死，求救各位大虾
作者:
greenhand101
时间:
2016-3-14 22:10
有没有支原体等的污染？培养液的PH是否过碱？
作者:
1276916287
时间:
2016-3-15 09:17
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chslyx
的帖子
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冻存液没有问题，但是细胞冻存及复苏的时候是否做到了慢冻快融很关键，特别的干细胞，冻存的时候有条件的话可以用程序降温仪，至少得用程序降温盒
作者:
1276916287
时间:
2016-3-15 09:17
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chslyx
的帖子
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冻存液没有问题，但是细胞冻存及复苏的时候是否做到了慢冻快融很关键，特别的干细胞，冻存的时候有条件的话可以用程序降温仪，至少得用程序降温盒
作者:
abcstem
时间:
2016-3-15 10:06
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chslyx
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确定培养条件和冻存前一样吗？试剂是否有换过？这种情况我觉得应该是培养液的问题，重新配培养液吧。
作者:
saliai2016
时间:
2016-3-16 17:17
不贴壁的话应该是死了吧
作者:
biluolinyu
时间:
2016-3-17 13:04
血清和冻存之前的尽量保持一致，另外不贴壁估计细胞也快不行了吧。。。
作者:
biovictor
时间:
2016-3-17 21:09
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chslyx
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楼主，做个PI染色就知道是不是死的了！很简单
作者:
chslyx
时间:
2016-3-21 11:40
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biovictor
的帖子
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染色后都没有死
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作者:
chslyx
时间:
2016-3-21 11:40
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biluolinyu
的帖子
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血清和培养基都是一样的
作者:
duwenjing
时间:
2016-3-23 14:14
你的这个细胞状态很不好了，你可以尝试着收集未贴壁的细胞（离心）重新接种，如果还不好的话建议放弃。
作者:
Jump
时间:
2016-4-12 00:18
加细胞因子试试
作者:
meredith603
时间:
2016-4-14 17:35
不死也扔了吧，至少是状态很不好了。-80度放一个月有点久，尤其是如果是公共冰箱经常被打开的话，没准温度忽上忽下已经很多次了。-80度放个一两天还是快点进液氮才靠得住。
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