干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 细胞计数时的气泡是如何产生的？ [打印本页]

作者: happy_noel 时间: 2016-3-18 13:04 标题: 细胞计数时的气泡是如何产生的？

在进行细胞计数时要打入细胞悬液，经常出现气泡影响计数，有时计数板和盖玻片用酒精和纱布擦的非常干净还是会有气泡，气泡是怎样产生的？怎样做才能避免气泡？

作者: tingting2113 时间: 2016-3-18 13:52

回复 happy_noel 的帖子0 R3 o+ t' O0 q$ L
& g8 v! X' H7 @
不知道你是用那种计数板进行计数的。你提到计数板和盖玻片那为什么是打入细胞悬液呢，这种应该是在计数板的计数区滴入细胞悬液在盖上盖玻片。盖的时候盖玻片先一侧挨上计数板再缓慢松手，如果还是有小气泡，可以用手轻轻按一下。

作者: 月_幻影 时间: 2016-3-18 14:02

加样时建议从一侧加样（偏靠边一点，液体在两侧盖载玻片接触的地方跑得快，很容易中间产生气泡），另外加样速度不宜太快，应缓慢加入。

作者: happy_noel 时间: 2016-3-18 16:40

回复月_幻影的帖子7 D" C7 U) t* j; N3 F5 y. [
1 Y: h4 c% c+ f$ l+ j+ R
气泡是不是由于盖玻片与计数板之间的空隙，空气不能完全排出产生的？我也从侧面加过，为什么反复几次还是有气泡？还是因为有水分不够干吗?

作者: 月_幻影 时间: 2016-3-21 08:56

回复 happy_noel 的帖子. Z o8 ?6 ]) G4 Y! M' i
" u7 C+ \ L6 e
缝隙肯定是有，计数板格线和盖玻片之间就是空隙，我个人的经验是，加样时从一侧缓慢加入，或者是将样品悬在枪头一滴，然后靠近盖载玻片边缘（也靠边点）让它自己吸附进去。我一直这样加，很久没出过气泡、、、
当然水分不够干也有可能会导致产生气泡，潮湿的地方样品会很快通过，干燥的地方慢自然会形成气泡。
（LZ你自己多试试，找找手感，我刚开始做实验的时候也会经常产生气泡）

作者: 1276916287 时间: 2016-3-21 10:31

确保细胞计数板和盖玻片是干的，加样的时候动作轻柔些，加样最后的时候移液枪不要打到第二档

作者: fenlichong 时间: 2016-3-22 11:11

我计数时都没有出现过气泡。建议如下：1，加样时，建议将移液枪抵在中央凹槽的一侧，打出的一滴靠虹吸将悬液吸入即可；2，每次使用时确保计数板和盖玻片用酒精擦洗干净；3，计数板和盖玻片是否是配套的，因为不配套的话可能对接不好，非原装盖玻片可能会偏薄而使液体易漂浮；4，使用计数板是国产还是进口，如果是国产，可以考虑换进口的试试。

作者: happy_noel 时间: 2016-3-22 16:37

回复月_幻影的帖子2 h1 I' {+ c2 ]. m+ _( G
/ G5 [2 L' d+ u, }& x6 }
好的，非常感谢

作者: happy_noel 时间: 2016-3-22 16:37

回复 fenlichong 的帖子& e. N& ?. a [# o* s3 d+ \
e l; R) F, ~7 V: V k
非常感谢

作者: zhang861006 时间: 2016-3-23 16:44

下次你打入细胞时，不要猛烈吹打，细胞混匀，静止片刻，轻吹慢打几下，缓缓吸出细胞悬液，匀速打入细胞计数室，操作得当，一般不会出现气泡！

作者: 晗晗 时间: 2016-5-3 11:14

建议从旁边的缝隙里加液体，慢慢的往里加，不要太快也不要太慢，可能是液体加的少也会出现气泡，液体也不要加太多

作者: 444352110@qq 时间: 2016-5-18 17:44

我的个人建议：
1、细胞计数板使用前要擦拭干净，包括牛鲍计数板和盖玻片。
2、建议用微量吸管充池，用微量吸管充池是不要用胶冒，让含细胞的培养液自然流入。# `5 m! \* ]. J- o% m* s
3、充池时要一次性充好，切记不要重复充池，以免造成细胞计数不准确。4 Q& J2 f1 d$ o6 Q R4 L
4、充池时要从一侧充池，液体不要太多，避免盖玻片飘起了，引起计数不准。
5、充池完成后，要静置一会再进行计数，这样可以避免计数不准确。

作者: Diane0321 时间: 2016-5-18 20:05

之前我也遇到这样的情况，换了张新的盖玻片就好了，你可以试试，希望有用，而且加细胞悬液的时候要小心从侧面加入，有时候手一抖就把盖玻片翘起来了，这样也很容易产生气泡。

作者: 田甜 时间: 2016-5-19 15:51

盖玻片，细胞计数板流水冲干净后，75%酒精浸泡，使用前拿出，低尘擦拭纸擦干；盖玻片放置好后，混匀细胞，细胞悬液是缓慢加在盖玻片边缘，液体是自己被虹吸吸进去的，不是打进去的，边吸边打。加满细胞巢室就停止，显微镜下计数。一般没有气泡，有气泡可能是计数板或盖玻片脏了吧。

作者: veda327 时间: 2016-5-20 10:25

更好的解决办法是让老板买自动细胞计数仪！

作者: ltickp 时间: 2016-10-26 15:28

无水乙醇和无尘布擦净计数板，10ul移液枪加样，混匀样品时温和点，吸取时注意不要有气泡，缓慢匀速沿边缘加入样品，加满缝隙就行，不必打完移液枪中液体，也不要让样品溢出，这样很难出现气泡，只要不是样品本身就很容易产生气泡，手法不是太差，一般不会有气泡

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)