干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 脐带间充质干细胞冻存密度 [打印本页]

作者: gehengcui 时间: 2016-3-22 16:45 标题: 脐带间充质干细胞冻存密度

实验室在培养脐带间充质干细胞，先前冻存密度是2*1000000，活率很好。目前想请教各位，是否可以提高冻存密度，能提高多少？如果是4*1000000会不会太大，细胞活率怎么样? （冻存液为90%FBS+10%DMSO）。望赐教。

作者: yooung 时间: 2016-3-22 17:53

有文献说冻存密度为5*10^6，冻存前平均活率为97.32%，经冻存复苏后平均活率为96.57%。所以4*10^6应该不算多，如果文献是真的话。

作者: xuyang0317 时间: 2016-3-22 21:32

1x10的7次方，你的冻存保护液成本很低啊！含有的水分子太多了，导致了冻存复苏成活率低！

作者: gehengcui 时间: 2016-3-23 09:43

回复 xuyang0317 的帖子
2 m, k3 q) Y7 m' ~3 j0 Y5 ]; L
嗯，一般细胞冻存液不都这样吗？您说的成本高的那种是用海藻糖和葡聚糖吗？

作者: duwenjing 时间: 2016-3-23 14:11

一般都是10^6

作者: fjq729587158 时间: 2016-3-23 18:05

一般冻存浓度是2×10E6~4×10E6

作者: 沙漠狐o0 时间: 2016-3-29 09:47

1*10^7是可行的。

作者: why77yhw 时间: 2016-3-29 15:03

冻存密度2 *106是没问题，这个常做的。4*106这个最近试过，没问题，可以放心冻存。个人认为你的冻存液成份比较不错，如果对冻存液想进一步探究，建议尝试下20%人血白蛋白+10%DMSO+DF/12(细胞培养基）

作者: jddakui 时间: 2016-3-30 10:10

冻存密度不能太低，一般不低于0.8X10^6/ml , 一般不超过5X10^6/Ml,细胞活率还跟你冻存前细胞生长状态有关系。

作者: yingfeixiang 时间: 2016-3-30 10:17

以前冻存密度2X10^6/Ml,现在改冻存密度5X10^6/Ml,复苏后细胞活率都在90%以上，在高的没试过不好说

作者: Jump 时间: 2016-4-12 00:14

可以的，我们冻过4-6

作者: Natalie 时间: 2016-5-16 09:39

我们一直都是4*106

作者: Natalie 时间: 2016-5-16 09:39

复苏之后效果还是蛮好的

作者: Natalie 时间: 2016-6-3 15:53

冻存浓度是2×10^6~4×10^6，我平日里都是4×10^6

作者: 晗晗 时间: 2016-6-6 08:50

可以的.不会影响细胞活率的

作者: 杏色玻璃 时间: 2016-8-8 09:55

回复 why77yhw 的帖子3 c3 S7 q3 g9 ] l" u% f8 f
6 d4 @2 x2 o' O) G% T
您好

作者: 杏色玻璃 时间: 2016-8-8 09:56

回复 why77yhw 的帖子

您好！请问20%人血白蛋白+10%DMSO+DF/12(细胞培养基）冻存后复苏活率能达到多少？谢谢

作者: 彭芳芳 时间: 2016-8-16 10:52

用你培养该细胞的完全培养基：DMSO=9:1的比例冻存，细胞浓度在5*10e6至1*10e7，活率都在90%以上的

作者: 308443730 时间: 2016-8-16 14:49

5*10^6以上的我们冻过，没问题，冻存液跟你的一样，只要你冻存的时候细胞生长状态比较好复苏一般就没问题

作者: saliai2016 时间: 2016-8-22 17:16

脐带间充质干细胞冻存的密度一般为1.0-5.0x10^6，在适宜冻存密度范围之内，密度对细胞的活力影响不是很大。

作者: LVXUEYAN1101 时间: 2016-9-5 15:56

我们一般用5X10^6-1X10^7之间，一般根据细胞状态来

作者: tyzbtx 时间: 2016-11-11 11:20

如果是人脐带源的间充质干细胞，我常规冻存密度是1*10^7/ml；复苏后活率大于90%；我试过2*10^7/ml，复苏后活率依然很高。- } W! C* H& X3 b

作者: ccfc 时间: 2016-11-11 11:49

间充质干细胞的冻存密度一般会根据实际收获的细胞数来定,但是不建议一个冻存管冻太多细胞,最多2X10E6,不然细胞活率无法保证.: ~! j3 N& F# M- F5 J

作者: 何如 时间: 2016-11-11 16:15

不太建议一管冻存太多细胞,2*10^6/ml算是偏多的类型了,一般是冻存1*10^6/ml,可以上下浮动一点.一次冻存太多虽然节约冷冻保护剂,但是对细胞作用会减弱,导致活率较低,得不偿失.

作者: 阳光正暖 时间: 2018-5-14 11:07

回复 yooung 的帖子1 t1 d4 P9 b+ m

你好，你是参考的什么文献，能分享一下吗？谢谢你

作者: yangzeqian 时间: 2018-7-2 10:45

在冻存的环节上，有很多问题需要注重，冻存液配比（fbs

MSO9:1，这个属于奢侈的了,可以尝试培养用培养基:FBS

MSO,4:5:1,调试培养基和血清的浓度达到你理想的冻存活率）程序降温，遵循慢冻速溶的原理，会对细胞复苏后的活率起到很大作用，冻存密度，我使用的是FBS:培养基

MSO，5:4:1，2毫升冻1×10的7次方，活率在复苏后台盼蓝染色计数活率为98%-98.9%，冻存时注意观察细胞状态，调整血清比例，按密度冻存一般问题不大

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)