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标题: 无血清培养MSC的问题 [打印本页]

作者: jingjing6837 时间: 2016-4-8 17:03 标题: 无血清培养MSC的问题

各位前辈请教一下，用无血清培养基培养MSC，发现细胞出现悬浮成球现象，请问是什么原因导致。之前细胞一直用的含血清的培养基培养，状态一直都非常不错，但是换成无血清后就出现这个现象，有没有和我一样出现过这个问题的前辈吗？现在应如果处理的这个悬浮细胞呢？

作者: flylover1221 时间: 2016-4-11 16:07

间充质干细胞是喜欢贴壁生长的，但是在不好的环境（营养缺乏）或者人为的环境（超低吸附的接触面）会自发的聚集成团。0 s) y5 u8 ]+ d$ Q+ y" Q
个人看法是你的培养基中营养成分匮乏，可以适当补充细胞因子。至于已经成团的细胞，很难消化吹散，不适合继续培养。

作者: cloudycity 时间: 2016-4-12 22:51

具体是满了脱落还是咋的？给个图看看最好。一般如果细胞悬浮结团，就是死了··· . x5 o8 Z5 |" `
1.用的什么无血清培养基？？该加的东西是不是全加了？有可能是你培养基没弄好。 {( Z4 h- m, j5 o4 V
2.也有可能是细胞不适应新的培养基，会出现一些死亡的，换液，传代适应一下应该会好。

作者: meredith603 时间: 2016-4-14 17:22

无血清的MSC我也养过，不会出现悬浮成球的现象，细胞形态和血清中有一点点不一样，但是还是好好的贴壁的。如果悬浮了，应当是不行了。实验条件，培养基，培养箱温度，CO2浓度，所有因素都要检查一遍。

作者: 未来之星 时间: 2016-4-21 16:26

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是不是细胞这样

作者: gxbzjznn 时间: 2016-4-21 19:12

细胞成团生长可能有很多原因 1、细胞本身具有成团性（例如、神经干细胞、乳腺干细胞） 2、营养物质匮乏或者不适合细胞生长导致细胞死亡，死亡的细胞会破裂，导致里面的遗传物质溢出，由于核酸等遗传物质具有粘附性，最终导致细胞成团生长。3、培养条件不合适，如温度、CO2浓度、湿度等，导致的培养基环境不稳定！4、其他

作者: suruyu 时间: 2016-4-22 07:56

同问：你用的什么无血清培养基？有的无血清培养基是需要添加因子使用的

作者: 未来之星 时间: 2016-4-22 08:39

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能不能上张图

作者: baby00000003 时间: 2016-4-22 08:48

建议认真阅读一下SF培养基的说明书0 v- O7 x* d: A# S
大部分SF培养基需要配合fibronectin包被的瓶子使用，或者cellbind之类的..../ ?3 r p9 y' m' b, \ m! ?
有些需要额外添加些东西，比如glutamine0 ]# ]& u7 ~: K% [0 t0 x
可以直接使用的不多，而且可以直接使用的品种效果都不甚理想（个人经验）

作者: 蚂蚁上树 时间: 2016-4-22 09:03

要看你的培养基是什么培养基，没有血清的话，有没有促细胞贴附的成分，MSC一般要用专用的无血清培养基的，不能人为地直接将普通的培养基去血清直接培养。悬浮聚团应该是贴壁细胞悬浮后表面电荷不适应所致。

作者: qiqishichaoren 时间: 2016-4-22 11:04

我也没养好，尝试过各种培养瓶，比如康宁的cellbind表面培养瓶，比如已包被过的表面。然后养好了，但是用普通胰酶传代法后的培养也是还是个问题。。。

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