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标题: 关于CIK培养前包被的问题 [打印本页]

作者: 吕小松 时间: 2016-4-27 09:55 标题: 关于CIK培养前包被的问题

请问CIK培养前要进行培养瓶的包被，我们采用的是2ml PBS+CD3单抗的方法，最近发现细胞活化的慢，会不会是我CD3包被的量太少了？请问正常的CD3单抗的量是多少？

作者: hwlightning 时间: 2016-4-27 10:16

还做什么包被，这么麻烦。现在都是直接第二天添加啊~~~

作者: hwlightning 时间: 2016-4-27 10:18

还有细胞活化慢，也有可能是患者细胞自身的原因。

作者: zhouweixing000 时间: 2016-4-27 10:56

直接第二天添加，现在很少有人做包被了

作者: 吕小松 时间: 2016-4-27 10:59

回复 hwlightning 的帖子
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那请问您对包被有了解么，包被CD3的量应该加多少？

作者: xiandi1234567 时间: 2016-4-27 12:14

5ug/ml，量很大！6 u2 ^! I( E. ^( Q7 c5 f( h

作者: veda327 时间: 2016-4-27 15:21

大家都变懒了还是变聪明了，现在绝大多数都是直接添加到培养体系里面了！

作者: stella2015 时间: 2016-4-27 15:36

包被完了要4度避光，把培养瓶用锡箔纸包严实了，4度过夜。

作者: yingjie 时间: 2016-4-27 15:42

包被处理，那里多久之前的培养方法了？现在都是第二天直接加CD3，添加的浓度是50-100ng/ml，你要包被的话，浓度肯定更高，建议500-1000ng/ml试试

作者: Natalie 时间: 2016-5-5 13:13

我们实验室以前是采用包被的方法的，后来不用血清了之后，直接第一天加因子了

作者: 吕小松 时间: 2016-5-5 14:29

回复 Natalie 的帖子/ P y! n7 c* y; ^, l, E5 f" Y9 Z
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CD3包被的量是多少呢？为什么采用无血清培养基就不包被了？

作者: Natalie 时间: 2016-5-5 15:41

提前一天1ng的 CD3加10ml PBS包被培养瓶，后来又测试了好几种实验方法，最后决定换了一套操作规程，就是用无血清的培养基加了点自体血浆，第一天加入全部因子，效果还不错呢

作者: sky512829 时间: 2016-5-5 17:23

学习一下

作者: 淘知路遥 时间: 2016-5-9 08:53

我们是提前包被室温平放，次日转至4℃，可保存一周左右，包被液再重复用一次

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