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标题:
CIK细胞生长缓慢，出现大量死细胞，会造成内毒素超标吗？
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作者:
小猫狸狸
时间:
2016-5-9 16:08
标题:
CIK细胞生长缓慢，出现大量死细胞，会造成内毒素超标吗？
最近有一份细胞生长较慢，细胞持续死亡，未染菌，出现内毒素超标>0.25EU/ml;请各位帮忙分析一下，是因为细胞死亡破裂，造成的干扰吗？
作者:
小刘
时间:
2016-5-9 16:16
估计哪个试剂出问题了，内毒素超标>0.25EU/ml，这就说明细胞不正常了，赶紧做检测吧，可以发一下细胞图片
作者:
小猫狸狸
时间:
2016-5-9 16:22
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小刘
的帖子
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6 M" f- F- |' X; F6 U2 ^. Z. S( @
试剂做过检测，没有问题；想知道是不是细胞死亡裂解产物造成的干扰呢？
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作者:
kelinzjf
时间:
2016-5-9 16:44
内毒素不会有问题，但是可能引起发热。
作者:
拉二胡的拉尔夫
时间:
2016-5-10 09:02
查查培养基和生理盐水的内毒素，做个阴性对照，制成制剂前多洗几遍
作者:
天冷
时间:
2016-5-10 09:55
内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁中的成分，不太可能是细胞死亡破裂造成的干扰，如果没有染菌的话检测一下培养基的内毒素吧，或者如果有添加血清检测一下血清的内毒素
作者:
小猫狸狸
时间:
2016-5-10 15:11
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kelinzjf
的帖子
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( U+ C& b/ b- z" Q* D
谢谢了
作者:
小猫狸狸
时间:
2016-5-10 15:12
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拉二胡的拉尔夫
的帖子
' H) n5 m5 q8 ~6 i( |& z& y
W) L3 U2 e) p& |& h
培养基和生理盐水的内毒素都没有问题，制剂洗个三四遍也合格了。
作者:
小猫狸狸
时间:
2016-5-10 15:30
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天冷
的帖子
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细菌内毒素及β-葡聚糖均能与鲎试剂发生凝聚反应，有没有可能是这个原因呢？
作者:
小猫狸狸
时间:
2016-5-10 15:42
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天冷
的帖子
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ph,蛋白质这些东西也会产生干扰。有没有可能细胞死亡裂解后释放大量的蛋白，造成干扰呢。细胞死亡率较高，大概在50%左右。
作者:
拉二胡的拉尔夫
时间:
2016-5-11 08:25
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小猫狸狸
的帖子
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0 G! p4 O- {% f' B5 x6 L; F) P
葡聚糖干扰是不可避免的，一般只能充分稀释了
作者:
天冷
时间:
2016-5-11 09:42
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小猫狸狸
的帖子
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( }4 @5 n& q4 e& W8 Y( {4 g. P0 | L
1、你可以取正常样品或者这份内毒素超标样品，离心洗涤后用无菌注射用水裂解，测一下内毒素的情况。
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2、β-D-葡聚糖和细菌内毒素都可以与鲎试剂发生凝聚反应，但是旁路是不一样的，你可以选择不会对β-D-葡聚糖其反应的特异性鲎试剂，也可以试着做一下干扰试验。
作者:
繁华落尽
时间:
2016-5-11 11:29
你可以从试剂添加的源头入手，譬如说因子，血清，相关的抗原或者抗体等，细胞的死亡不会造成NDS的升高，NDS来源于革兰氏阴性菌相关。
作者:
我是传奇
时间:
2016-5-12 15:08
推测你用的国产培养基。
作者:
conquer123
时间:
2016-5-12 15:20
内毒素是革兰氏阴性菌细胞裂解后细胞壁释放出来的成分，cik细胞是没有细胞壁的。你可以对细胞悬液进行革兰氏染色、平板检测，排除染菌干扰；再对你所使用的试剂进行内毒素检测，希望可以帮到你！
作者:
小猫狸狸
时间:
2016-5-13 13:52
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天冷
的帖子
W7 a% j) M; C9 f
9 ]3 W% h* N, u: Z6 I
好的，谢谢解答
作者:
小猫狸狸
时间:
2016-5-13 13:53
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繁华落尽
的帖子
! y+ v9 I6 Y c, k
; D/ C4 ~* Z7 E$ a( T2 d1 L; e
好的，谢谢解答
作者:
小猫狸狸
时间:
2016-5-13 13:53
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我是传奇
的帖子
+ v3 O' N- y, m$ K
; x1 Z( F$ t1 b1 A; z
corning，应该还好吧
作者:
小猫狸狸
时间:
2016-5-13 13:54
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conquer123
的帖子
" ?4 ]/ R- m* m. C' u
- C5 Y* z( U: E, W1 R
嗯，已确定不是染菌，怀疑是别的物质造成的干扰
作者:
小猫狸狸
时间:
2016-5-13 13:56
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拉二胡的拉尔夫
的帖子
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( X1 u$ C$ _9 o9 o: `- A) G, Z
稀释的时候，内毒素也会稀释，一般换用更高灵敏的的鲎试剂可以解决这个问题吗？
作者:
我是传奇
时间:
2016-5-16 11:35
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小猫狸狸
的帖子
3 a! p! k6 @, t/ l* F
5 Q, x. R6 L/ X
康宁的应该没问题 551？581？
作者:
小猫狸狸
时间:
2016-5-16 13:14
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我是传奇
的帖子
. E5 X7 s. `" f% @4 V
5 ^* n* K. H. D0 N% A
KBM581
作者:
我是传奇
时间:
2016-5-16 13:21
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小猫狸狸
的帖子
7 y' {7 K# E& L! J x" b Z; W. a
( _# t+ {8 m+ A5 u3 Z8 ?
若怀疑内毒素有问题可以测一下，很简单。
作者:
小猫狸狸
时间:
2016-5-16 15:07
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我是传奇
的帖子
! t$ s k" k: ]- e1 i( E% l9 S
' t" M# ?1 o$ z$ I! D1 Y
已经测过了，没问题。前面大家提到的可能的原因都已经排除了，就剩下细胞了。。。。
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