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标题: CAR-T细胞治疗中，T细胞转染效率低且不稳定如何解决？ [打印本页]

作者: 842195369 时间: 2016-5-19 15:46 标题: CAR-T细胞治疗中，T细胞转染效率低且不稳定如何解决？

CAR-T细胞治疗中，T细胞转染效率低且不稳定如何解决，大提质粒和小提质粒对转染效率有啥影响？

作者: veda327 时间: 2016-5-19 17:29

小提的质粒的浓度和纯度都是达不到转染的要求的，所以需要大量提取以提高所获得的质粒的纯度和浓度，并且要一定程度上去除内毒素，以减少在转染的时候对包装细胞的毒性和内毒素在整个体系中的残留。' @6 G# t# O* x0 H. ^3 Q; z* O4 d
T细胞转染效率低，不知道您是用的什么方法转化的，慢病毒、逆转录病毒、普通质粒或者转座子，不同方法中对效率的因素有多种；这些方法中，以慢病毒的转化效率为最高，普通质粒转化效率最低，且不能持续表达CAR结构！

作者: ET生物人 时间: 2016-5-20 09:24

我们是用大提，然后慢病毒感染！！开始不稳定，效率低！！最近两次方法都差不多，感染效率就高！！真搞不懂

作者: 842195369 时间: 2016-5-20 09:30

回复 ET生物人的帖子- J6 a9 h- o4 w( G6 Y( t

我们也出现这种问题，你们采取的什么解决方法啊，控制单一变量查找问题了吗

作者: 小刘 时间: 2016-5-20 09:32

大提质粒较为合适

作者: ET生物人 时间: 2016-5-20 09:36

回复 842195369 的帖子

其实也没改变什么，做得基本上都一样的操作的，所以才搞不懂啊！

作者: 随时准备下线 时间: 2016-5-20 16:01

回复 ET生物人的帖子
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老师可否告知具体操作方法？刚接触这个，不太懂。效率一直非常低！

作者: 六弦七品 时间: 2016-5-20 16:58

你们转染效率有多少？我也碰到类似问题，转染效率上不去，还不稳定，不知道原因在哪里

作者: veda327 时间: 2016-5-23 11:50

病毒包装了之后要检测病毒的滴度！

作者: ET生物人 时间: 2016-5-23 14:50

回复随时准备下线的帖子
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其实具体方法都差不多，大家都是查查文献，大部分按照文献前任的方法来做

作者: tyzbtx 时间: 2016-7-7 09:33

如果用逆转录病毒的话，建议你检测下病毒滴度，小于10^6数量级的转染效率低且不稳定。

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