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标题: 原代细胞污染 [打印本页]

作者: tlms1991 时间: 2016-6-11 11:27 标题: 原代细胞污染

最近取脐带，组织块法培养脐带间充质干细胞，顺带取脐静脉内皮细胞，离心后接种细胞就看到有细菌在活跃，觉得可能是天热所以容易滋生细菌，该怎样减少污染呢？急急急！

作者: gxbzjznn 时间: 2016-6-11 12:12

加点双抗或者肝素

作者: veda327 时间: 2016-6-11 14:22

离心后接种细胞就看到有细菌在活跃？" v0 u% z. D8 L& {
这个从取样到离心的操作时间有多长，如果时间短的话不大可能是生长的细菌，细菌的生殖周期在30分钟左右，一开始的数量不会很多！

作者: chenguangyu 时间: 2016-6-12 08:13

首相自检一下各种试剂和耗材，安全柜培养箱是否是无菌的，在保证标本无菌和无菌操作合格的情况下，一般很难被污染。加点双抗可以预防一下，但不能依赖加双抗来避免污染。

作者: 2357710447 时间: 2016-6-12 08:50

回复 chenguangyu 的帖子
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抗生素的量一定要控制好对细胞的生长有抑制作用而且时间太长的话细胞的形态很差流失很难检过

作者: zhouweixing000 时间: 2016-6-12 08:53

初步判断这种污染储存脐带的溶液或者容器有问题，先去自检一下，如果都没问题可能就是取脐带的过程有问题，双抗和肝素钠是需要加一点的，你的这种情况我不认为是耗材或者是你操作过程有问题

作者: 晗晗 时间: 2016-6-12 08:59

用PBS洗洗,然后加双抗试试

作者: 随时准备下线 时间: 2016-6-12 09:58

脐带保存液是不是污染了？这么短时间就可以看到细菌，除了这个问题，只能是你处理样本时间放置太久了，同时留取样本可能也有一定问题。

作者: 月_幻影 时间: 2016-6-12 10:22

组织块法培养的话，在分离华通氏胶前先用加了双抗的PBS反复清洗至没有血污，然后要保证整个操作过程的无菌、器械的灭菌是否彻底等。。。

作者: Natalie 时间: 2016-6-12 10:36

你先检测一下组织保护液是不是污染了，其次加点庆大或者肝素，注意无菌操作

作者: tlms1991 时间: 2016-10-6 19:36

谢谢大家，最近一直没来看帖子。前段时间，虽然有污染，但是传代下去的内皮细胞生长还是不错的，也看不到会动的黑点。有时候我怀疑，细胞是可以和少量细菌共存的。

作者: ltickp 时间: 2016-10-20 14:40

脐带消毒时间适当长点，分离器械和安全柜要无菌，注意无菌操作

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