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标题: 免疫细胞复苏 [打印本页]

作者: 刘随新123 时间: 2016-7-15 10:45 标题: 免疫细胞复苏

人白细胞冻存后怎样复苏，步骤？越详细越好

作者: 奇幻雪蓝 时间: 2016-7-15 11:33

你复苏后要干什么？

作者: yingfeixiang 时间: 2016-7-15 15:22

复苏不都是慢冻速溶吗

作者: 刘随新123 时间: 2016-7-15 15:23

复苏后培养啊，需要离心力和离心时间，想找一个参考，谢谢！

作者: sryanhong 时间: 2016-7-15 17:06

37度水浴融化至米粒大小，将冻存细胞转移到事先准备好的装有培养基的离心管中。（在吸取细胞时多做要缓慢，因为此时的细胞最脆弱）然后1200rpm，5min离心，弃掉上清，用新鲜培养基重悬后接种即可。

作者: 刘随新123 时间: 2016-7-15 17:17

回复 sryanhong 的帖子
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哦，1200rpm转速会不会大了点?你们的培养基是什么牌子的，放血清吗？

作者: sryanhong 时间: 2016-7-15 17:41

回复刘随新123 的帖子! q) Q# O% R; Z3 E( T! r, q/ n( t) V# `

如果觉着转速大可以降到800rpm。培养基是T551，加5%血清足够了。后期如果细胞状态好的话，完全可以不加血清

作者: 生物太次郎87 时间: 2016-7-18 08:27

若是临床试验静脉回输用，可以将冻存管中的细胞转移至50ml离心管中，生理盐水定容至50ml，900rpm，10min，收集装袋（装袋前取样测活率）。若是再培养就如sryanhong所说，离心参数为900rpm，10min即可。若有疑问，欢迎交流，哈哈。

作者: 刘随新123 时间: 2016-7-18 08:54

嗯嗯，准备做了，谢谢大家的意见，

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