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标题: 免疫细胞储存 [打印本页]

作者: 刘随新123    时间: 2016-7-18 08:58     标题: 免疫细胞储存

把白细胞分离后要将里面的粒细胞,单个核细胞,淋巴细胞,NK细胞进行分离和培养,各位小伙伴,有做过的吗?需要大家的帮助,谢谢!
作者: 只因偶然    时间: 2016-7-18 14:04

你是想培养什么细胞呢,是需要培养纯的细胞吗?如果是用细胞因子法诱导分化培养细胞是无法培养出纯的单系细胞的。只能用磁珠分选法培养纯的单系细胞,磁珠分选法也是有纯度跟得率的说法的,得到的细胞也不是完全意义纯的单系细胞,就看你的需求与用途了。
作者: lele    时间: 2016-7-18 14:22

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8 x" t# H1 l9 m* V同意楼上说法。
作者: ciweiyuan    时间: 2016-7-18 14:30

回复 只因偶然 的帖子. V3 ]7 y( X; p3 }* ~/ u

9 ~0 q" ?1 B% }3 Q+ B( a同意,赞
作者: 刘随新123    时间: 2016-7-18 15:53

回复 只因偶然 的帖子2 ^. Y; G* u0 G2 K, n0 F  n9 _3 ^
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我们是要做免疫细胞银行,外周血去除红细胞后,剩余的白细胞,然后进行筛选,不同的细胞,T细胞,NK细胞,DC细胞计划是这几种细胞培养
作者: 只因偶然    时间: 2016-7-19 16:12

回复 刘随新123 的帖子2 V; N% B. @0 K0 T0 ?

6 q9 h, w. S& i0 g: pT细胞太笼统,T细胞是分为很多种的。如果你们是想做细胞银行,就看你们的业务是朝什么方向拓展,同时技术方向是怎么走。一般的做法是采集外周血,提取PBMC,然后进行存储。等存储到一定的时间客户提出自己的需要之后,比如5年后他想做NK细胞治疗了,再复苏PBMC进行诱导分化成NK细胞进行培养。如果你们是提取出PBMC诱导分化后用免疫磁珠法分选出NK细胞再扩增,最后储存NK细胞也不是不可以。不过储存的细胞应用范围就只能做NK治疗了,要是以后有更先进的细胞技术,他想做其它的细胞治疗技术就做不了了。所以细胞银行存储什么细胞事先一定要考虑好。
作者: 丽丽    时间: 2016-7-20 09:38

同意楼上的.
作者: 刘随新123    时间: 2016-7-25 15:19

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你好,我们是分离白细胞,将白细胞冻存,然后很多年后根据患者需要分离某种细胞进行培养
作者: 我是传奇    时间: 2016-7-26 16:15

精确分选必须用磁珠。但是如果分选这么精细成本很高,得率也会降低,具体可咨询美天旎的技术支持,不过好像他们的技术支持也很一般。
作者: 生物太次郎87    时间: 2016-8-1 12:52

PBMC包括淋巴细胞和单核细胞。单核细胞经细胞因子诱导可分化为树突状细胞(DC)。淋巴细胞包括T淋巴细胞和B淋巴细胞,在体外用多种细胞因子(IL-2、CD3、IFN-β)共同诱导培养获得的一群异质细胞,称为细胞因子诱导杀伤细胞CIK。一般我们车间在单个核细胞接种2小时后,将贴壁细胞接种IMDM基础培养基+诱导因子培养DC,悬浮细胞接种DMEM/12培养成CIK。




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