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标题: 支原体检测方法？？？求助 [打印本页]
作者: 凡凡    时间: 2016-8-3 11:09     标题: 支原体检测方法？？？求助

检测培养基中支原体，现在建立方法，不要药典中的培养法时间太长。大家都用什么方法检测啊？？？0 V- S& F4 t' v, i3 C: G( [# \& _8 V
另外PCR检测方法了解过，其中的EB染色那块有点害怕啊，大家怎么处理呢？, c3 g9 i; i/ V3 q( L
作者: baby00000003    时间: 2016-8-3 11:50

....外包好了，样本送出去，报告打回来，花点钱就ok了～
作者: 凡凡    时间: 2016-8-3 13:22

回复 baby00000003 的帖子8 H9 `  ]" e# a8 h! K) ?* U# L

+ g$ H% p( c" i" M# ~, Y老板不让啊
作者: yingfeixiang    时间: 2016-8-3 14:06

有鉴定培养基和染色法
作者: gondobar    时间: 2016-8-3 15:54

外包300，靠谱还有三方检测戳！
作者: 2357710447    时间: 2016-8-4 14:13

直接跑PCR 凝胶成像      最直接就是外包送检   每个才二十多块钱    可以省略很多事   呵呵
作者: splinkerette    时间: 2016-8-6 16:31

PCR检测的方法，害怕EB染色？你们实验室不做分子实验吗？凝胶成像势必要用到核酸染料，即使不用EB，用其他染料也行啊，这应该不是个问题把？
作者: shuimiao327    时间: 2016-8-11 09:25

支原体检测，如果不用培养法的话，用PCR-ELISA法检测
作者: edwardellen    时间: 2016-8-12 08:56

买ELISA的试剂盒呀，或者用花青素代替EB做染色，也很好用呢。
作者: qinchuanniu    时间: 2016-8-12 09:06

回复 凡凡 的帖子; G) X  G1 j- p, o; F& ]; ^& @! ~
8 O; b! P. H& @
支原体检测.doc (67 KB) 4 y) W' e% v* U* p6 O
还可以设计支原体通用引物做PCR检测

附件: 支原体检测.doc (2016-8-12 09:04, 67 KB) / 下载次数 5
http://www.stemcell8.cn/forum.php?mod=attachment&aid=Nzk1MzR8MTBhNWJhY2R8MTc5MzM1NjExNnww
作者: lgdx1234    时间: 2016-8-12 11:41

可以用DAPI染色看看，把细胞固定之后染色就可。" a+ i5 r% {# ^  |0 z- X& q

3 F) Y* x% B5 L9 ]8 ^被污染了的话，细胞周围会呈现雾状。
作者: Jiangshi90    时间: 2016-8-30 09:38

还可以用DNA检测呀，将可疑样品同指示细胞共培养后，染核，指示细胞核周围如果观察到周围有荧光斑点或荧光颗粒，说明是支原体污染，DNA检测所用的指示细胞通常是细胞质区域较大的Vero细胞。
( V% u! ], x: [但我觉得还是用PCR的方法更加简便和精确些，EB只在60度以上才会挥发，配胶时注意将胶冷却至50度左右再加EB就不会出问题，另现市面上有很多EB替代物
作者: 风倾颜    时间: 2016-9-1 13:44

我们是第三方检测的，很方便，送过去样本，过几天就出来检测报告啦
作者: abc2613130    时间: 2016-9-1 13:50

支原体快速检测试剂盒
作者: sfnana    时间: 2016-9-2 09:16

PCR的方法，可以快速检测，如果担心EB的话，买点EB替代物就行，现在这些EB替代物都是低度甚至无毒的了。最省事的方法还是外包，第三方检测，不过时间相对自己做要长一点点。
作者: LVXUEYAN1101    时间: 2016-9-2 09:26

PCR检测，最省事的办法是外包第三方检测
作者: 风倾颜    时间: 2016-9-2 11:28

PCR检测就行，也可以外包，报告什么的都有，又快又省事
作者: UlissesJR    时间: 2016-9-5 16:12

培养48小时，时间不长吧
作者: sunny2829    时间: 2016-10-14 15:28

现在PCR不用EB的了，可以用 Genecolour TM 核酸染料，无毒性的。+ ?2 `5 L& R2 }6 ^5 f
我们用巢式PCR进行检测。
作者: yingfeixiang    时间: 2016-10-14 15:36

还有有鉴定培养基主要是变色原理和染色法主要是荧光显微镜方法，都可以的。不行外包吧，几十块的事
作者: 淘知路遥    时间: 2016-10-20 14:24

有支原体检测培养基，20T/盒，把待检物放入培养基，培养箱放24h看结果
作者: 免疫与细胞    时间: 2017-2-13 13:42

回复 2357710447 的帖子/ @% \- O  ~( \7 i
, @1 G4 n/ n8 ^- e. k
请问可以哪里送检，我们想送出去检测。
作者: 免疫与细胞    时间: 2017-2-13 13:43

回复 baby00000003 的帖子  E! H% `8 I7 G) S; ]% H  U" ?
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什么单位可以送检，北京这边有吗？
作者: 免疫与细胞    时间: 2017-2-13 13:47

回复 风倾颜 的帖子: G- \# D! M: I5 ~7 p' x7 Y

4 a: S% k( g$ {; \6 ^% w请问是什么机构可以检测
作者: baby00000003    时间: 2017-2-13 14:43

回复 免疫与细胞 的帖子7 q( a. W7 C( h0 i5 O0 c
) q) R9 |# P9 d/ _8 m1 i2 ?1 \
这就不知了，一般医学类的检验所都可以的吧～或者自己买个qPCR的试剂盒在高校里找人代工～
作者: 追风筝的July    时间: 2017-2-15 09:25

之前接触过，可以用化学发光法检测，用的是荧光酶标仪，但是试剂盒比较贵，lonza的支原体检测试剂盒，另外珠海丽珠家有一个检测支原体的试剂盒，这个比较便宜，
作者: janhwa74    时间: 2017-5-12 20:49

回复 yingfeixiang 的帖子8 e  M8 K/ O. |2 w9 X5 N

5 k) A' B% d! ?  I5 D荧光法现在也慢慢在淘汰了，主要是误差比较大，新手不容易掌握，假阳性率高，可以达到20-30%。现在用得最多的是PCR法，也是最灵敏的方法。
; t8 J+ [: `3 m) `8 K: C2 Z) {发光法灵敏度比PCR法稍差，但是操作比较方便，可能是由于仪器比较贵，目前还不是主流。
作者: wangddk    时间: 2017-5-14 14:40

最省事就是找有检测资质的实验室帮忙检测吧



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