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标题: 急求：从人血细胞诱导培养ips的protocol及文献 [打印本页]

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作者: 基因疗法    时间: 2016-8-9 22:55     标题: 急求：从人血细胞诱导培养ips的protocol及文献

实验室只有人的血细胞没有皮肤组织细胞，看文献上都有从皮肤细胞生成fibroblast再诱导ips，所以急求从人血细胞诱导培养ips的protocol及文献，多谢各位高手

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作者: anning111    时间: 2016-8-10 12:44

人血细胞有多种 细胞，红细胞没有细胞核，不能重编诱导，免疫细胞可以的，加入四个因了的慢病毒，再加入VC和VPA 换上ES 培养基就可以的，这个很成熟了，都差不多

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作者: 基因疗法    时间: 2016-8-10 22:15

回复 anning111 的帖子
0 E3 f8 `, `5 H2 z: o) C: \
6 ~4 ?  _# }* l# ^您好，我确实是新手，请问有没有相关的protocol或文献，十分感谢

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作者: anning111    时间: 2016-8-11 12:48

Induction of pluripotent stem cells from fibroblast
9 C0 Q# z9 N1 y( R, mcultures
$ Z* e. h. Y' A/ h
) Z( \8 y% U! E( VKazutoshi Takahashi, Keisuke Okita, Masato Nakagawa & Shinya Yamanaka

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作者: 基因疗法    时间: 2016-8-12 00:10

anning111 发表于 2016-8-11 12:48 & G; a4 B9 d5 `# \' d# I
Induction of pluripotent stem cells from fibroblast
* f6 s$ q  B  t7 tcultures

: o2 U( X0 s& L这个还是从皮肤细胞诱导啊，我想说有没有用血细胞诱导的

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作者: pauldong    时间: 2016-8-12 09:03

有的，不过比较难做，因为从血细胞诱导出没有遗传记忆的ipsc需要扩增血液中的有核红细胞，有核红细胞在血液中含量很少，所以第一步要突破这个难关。7 m/ C' }! n. ~2 c' R
然后用episomal的方法就可以很有效的获得ipsc了。从T细胞或B细胞中获得ipsc也可以的，但是需要用病毒，而且获得的ipsc也是有T细胞遗传记忆的。

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作者: 基因疗法    时间: 2016-8-12 21:45

pauldong 发表于 2016-8-12 09:03 2 t3 ~  z- Y3 [2 P
有的，不过比较难做，因为从血细胞诱导出没有遗传记忆的ipsc需要扩增血液中的有核红细胞，有核红细胞在血液 ...

3 W8 `( q( Q7 j$ k0 j给个这方面protocol或文献行吗

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作者: anning111    时间: 2016-8-15 09:00

行行行，我发几篇文章你看，
, x* n! J! \; ], V' z. Y' a1，Chou BK, Mali P, Huang X, Ye Z, Dowey SN, Resar LM, et al.- a4 i% r; U- k& f4 H3 ^3 P
Efficient human iPS cell derivation by a non-integrating plasmid9 p4 o1 v9 n- S( a' ?8 a. h
from blood cells with unique epigenetic and gene expression signatures.& ~3 C5 _0 z5 N1 g
Cell Res 2011; 21(3): 518-29.
+ ]# g/ t0 e8 K0 i2Kim K, Doi A, Wen B, Ng K, Zhao R, Cahan P, et al. Epigenetic: j8 i5 _5 x2 x
memory in induced pluripotent stem cells. Nature 2010;
3 a# o) O/ p* [% h- G2 C7 i5 N' T467(7313): 285-90.
8 h: N- y" D* _6 ]) a1 b# w3Loh YH, Agarwal S, Park IH, Urbach A, Huo H, Heffner GC, et al.: Z: O) N9 A* j
Generation of induced pluripotent stem cells from human blood., F. V  \0 W* L: M: C8 ^8 M1 _7 c
Blood 2009; 113(22): 5476-9.
- V; A) @$ S  a* w/ {4Haase A, Olmer R, Schwanke K, Wunderlich S, Merkert S, Hess
, {+ y- F+ E- E, {C, et al. Generation of induced pluripotent stem cells from human
  F9 E+ P" \% @6 K, A5 bcord blood. Cell Stem Cell 2009; 5(4): 434-41.
, Q7 v; h/ n2 W; s  s5Giorgetti A, Montserrat N, Aasen T, Gonzalez F, Rodríguez-Pizà I,/ f$ W/ e+ X/ s8 v! T( M+ w  q
Vassena R, et al. Generation of induced pluripotent stem cells from9 b7 c0 d( C" {" U- l! W( Y
human cord blood using OCT4 and SOX2. Cell Stem Cell 2009;3 G5 x6 M0 ?9 ~+ J% |  D% O
记得多给我评点分哈，谢谢了，有什么问题可以问我哈) ?- c1 b/ o* q" X9 p5 T9 `

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作者: 基因疗法    时间: 2016-8-15 22:57

anning111 发表于 2016-8-15 09:00 ) Z& m; Y+ ?1 m% m4 j0 l
行行行，我发几篇文章你看，( A6 Q& m6 k( D; s' m* ^  s' N. @
1，Chou BK, Mali P, Huang X, Ye Z, Dowey SN, Resar LM, et al.; F2 z0 H. \, S0 H( |$ M
Efficient ...

/ D3 O8 w+ u% q6 d+ }- c( \
太感激了，我先看看

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作者: 基因疗法    时间: 2016-8-15 23:14

anning111 发表于 2016-8-15 09:00 ; }2 j/ {4 |0 V# ], P
行行行，我发几篇文章你看，
+ J/ ^1 d7 n- t, o+ \$ j1，Chou BK, Mali P, Huang X, Ye Z, Dowey SN, Resar LM, et al.
+ x- s, O0 c5 r9 A) [Efficient ...

- {; |3 Q" ?( K
现在级别太低评不了分，但回头一定补上

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作者: pauldong    时间: 2016-8-16 13:36

回复 基因疗法 的帖子
1 w! D7 m. K2 q( `/ l6 [+ j
7 Z2 K0 V' Y0 z可以，erythoblast的方法你自己找找，我还没仔细去研究，PBMC的方法有一篇文献传给你，[attach]79592[/attach]，这边还可以，然后看看相关参考文献就差不多了

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作者: 基因疗法    时间: 2016-8-17 01:35

pauldong 发表于 2016-8-16 13:36
% L. v& n# v* s; T1 U8 v回复 基因疗法 的帖子
3 e1 l$ x! [" H! P0 b! e! b! f
' P1 y, z7 t" q% W! ?# _# U可以，erythoblast的方法你自己找找，我还没仔细去研究，PBMC的方法有一篇文献传给你 ...

' s8 H# [3 u' S# \) `
非常感谢，待我分高了之后能评分了，一定给您上分

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