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标题: 《cell》文献翻译:到达断裂位点时的DNA复制 [打印本页]

作者: bobo 时间: 2009-5-18 12:46 标题: 《cell》文献翻译:到达断裂位点时的DNA复制

John H.J. Petrin
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Cell, 137, 211 – 212, April 17, 2009

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造成DNA复制叉停滞和损伤的DNA链断裂对DNA复制过程是有害的。Doksani等在本期Cell分析了在裂殖酿酒酵母中，双链DNA的单点断裂对DNA复制的影响。! i7 I$ I: R9 t3 j( V$ z' Y
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DNA双链断裂通常是DNA复制的副产物，但DNA损伤关卡的明显激活一般不与细胞通过S期的过程同时进行。有关DNA损伤关卡调节的流行观点是假定关卡激酶Mec1/ART的活化及其活化的影响（如复制原点启动的抑制）是由单链DNA促成的。对与DNA复制有关的双链断裂中关卡途径的忽视引发了一些有趣的问题。双链断裂的一条链必须被切除以便形成单链DNA。在S期产生的双链断裂是否不被切除？当复制叉遇到双链断裂时会发生什么？
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Doksani等在本期Cell分析了这些问题。他们使用芽殖酵母HO（同宗转换）内切核酸酶，该酶可在单个DNA位点诱导双链断裂。在该HO内切核酸酶系统中，HO位点与一个有效的早期DNA复制原点ARS305相邻。HO内切核酸酶的瞬时活化与酵母细胞进入S期同时发生，这对细胞通过S期的动力学没有什么影响。在80分钟之后，即细胞已经完成了S期之后，才能观察到Rad53的依赖于Mec-1的磷酸化(Rad53是细胞周期因响应DNA损伤而停止时所必需的关卡激酶)。这并不是由于缺少双链切割，因为Doksani等的实验表明在S期细胞中，双链断裂切除的速度与G2期细胞没有什么本质的不同。DNA双链断裂发生80分钟后才能看到Rad53的活化，这与先前的观察十分吻合：引发关卡响应需要约10 kb的单链DNA，HO内切核酸酶对断裂的切除速度是约4 kb/小时。换句话说，需要有约80分钟才能得到激活Rad53所需要的单链DNA(在两个方向各切除约4 kb产生约10 kb的单链DNA)。
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这是否意味着单个双链断裂没有任何影响？并不完全是这样，但它的影响完全出乎意料。Doksani等人所研究的特定双链断裂对S期的酵母群体的影响没有达到100%，但他们也进行了局部分析。他们不仅用双相凝胶分析了复制原点的启动，也分析了与断裂位点相邻的DNA复制叉的进程。复制体（在复制原点进行DNA复制的蛋白质复合物）在接近断裂位点时并未停止，也没在断裂位点的另一侧重新启动。这意味着一旦复制叉到达断裂点，复制体将从DNA上解离。实际上在每次复制原点启动时，可产生两个向相反方向行进的姐妹复制叉。有可能存在“复制工厂”，使在不同姐妹复制叉上的复制体以偶联的方式工作。这种可能性表明在断裂位点的一个姐妹复制体的解离可影响另一个复制体。但正如Doksani等展示的，实际情况并非如此，因为在305L的姐妹复制叉305R从DNA上解开后，305L复制叉上的复制体在很长时间内仍继续行进。这与最近在大肠杆菌中得到的数据很相似，大肠杆菌的两条姐妹复制叉不以偶联的方式行进。
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令人惊讶的是，Doksani等人的研究表明，HO内切核酸酶断裂位点的诱导实际上可增加芽殖酵母ARS305复制原点的启动。对靠近天然HO内切核酸酶断裂位点ARS313和ARS314的两个静止复制原点的分析支持上述解释。Doksani等发现双链断裂的诱导可使静止的复制原点活化，这两个复制原点都可启动。这种影响是局部的，因为S期的总速度没有变化，说明在双链断裂诱导后，大多数静止的复制原点保持在活化状态。使复制原点活化的信号是什么尚不清楚，目前还没有可阻止产生这种活化的酵母突变株。由于这种活化的局限性，令人想到它是一种反式作用机制。Doksani等假定断裂诱导的DNA超螺旋的变化以及染色质的改变可能是影响复制原点活化的因素。DNA广泛断裂和解离的产生条件可活化DNA损伤关卡，抑制复制原点的启动，它们可能会超越这种新鉴定的机制。* }* O# m8 ^% O8 W3 u: b  `
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Doksani等还发现在断裂位点缺少Sae2和Tel1蛋白以及在缺少Mrel1复合物时，在双链断裂位点可形成十字形DNA结构。这些通过双相凝胶电泳鉴定的结构可能是所谓的“鸡爪”结构，这种结构是由于诱导双链断裂后退的Sgs1解旋酶的作用而产生的。这可能意味着由复制叉和双链断裂引发的变化与羟基脲造成的复制叉停顿引发的变化在某种程度上类似，但有一个重要不同，即关卡缺陷并不是这类结构形成的基础。Doksani等提出了一个Tel1和Mrel1复合物可使复制叉的一条臂水解的模型。这可能会阻止复制叉在断裂位点的后退以及其后产生的十字形结构的切割。总体来说，Doksani等人提供的证据表明在总DNA损伤关卡活化门槛之下的DNA损伤水平可通过异乎寻常的方式影响DNA复制过程。

作者: gggarfield 时间: 2009-6-10 21:49

受益了，谢谢

作者: MIYAGI 时间: 2015-5-28 15:16

好人一个

作者: 大小年 时间: 2015-5-28 23:01

厉害！强~~~~没的说了！

作者: 杏花 时间: 2015-6-1 09:10

赚点分不容易啊

作者: bluesuns 时间: 2015-6-7 10:54

昨天没来看了～～

作者: aakkaa 时间: 2015-6-9 12:49

祝干细胞之家越办越好~~~~~~~~~`

作者: 123456zsz 时间: 2015-7-6 10:25

谢谢哦

作者: 舒思 时间: 2015-7-17 08:54

我想要`~

作者: 陈晴 时间: 2015-8-2 19:00

这贴？不回都不行啊

作者: 兔兔 时间: 2015-8-23 07:54

呵呵都没人想我~~

作者: 兔兔 时间: 2015-10-6 18:54

嘿...反了反了,,,,

作者: 陈晴 时间: 2015-10-26 18:00

一个人最大的破产是绝望，最大的资产是希望。

作者: immail 时间: 2015-11-22 10:53

知道了不错~~~

作者: 命运的宠儿 时间: 2016-1-7 10:27

太棒了！

作者: biodj 时间: 2016-5-11 17:42

哎怎么说那~~

作者: 王者之道 时间: 2016-5-29 16:10

不错啊! 一个字牛啊!

作者: 龙水生 时间: 2016-6-1 19:14

围观来了哦

作者: 橙味绿茶 时间: 2016-7-8 13:27

原来这样也可以

作者: youngcell 时间: 2016-8-9 18:30

我帮你喝喝

作者: 8666sea 时间: 2016-8-30 13:17

严重支持！

作者: 苹果天堂 时间: 2016-9-2 20:01

干细胞抗衰老

作者: lalala 时间: 2016-9-23 15:53

羊水干细胞

作者: dongmei 时间: 2016-9-26 14:18

好困啊

作者: chongchong 时间: 2016-10-7 19:24

希望可以用些时间了~````

作者: yunshu 时间: 2016-10-13 15:19

好人一个

作者: chongchong 时间: 2016-10-20 18:42

不早了各位晚安~~~~

作者: 小丑的哭泣 时间: 2016-11-29 18:19

拿把椅子看表演

作者: 苹果天堂 时间: 2016-12-29 11:18

似曾相识的感觉

作者: cjms 时间: 2017-1-15 00:27

一个人最大的破产是绝望，最大的资产是希望。

作者: 风云动 时间: 2017-1-21 11:44

支持~~顶顶~~~

作者: doc2005 时间: 2017-1-25 04:38

病毒转染干细胞

作者: 考拉 时间: 2017-2-3 19:54

问渠哪得清如许，为有源头活水来。

作者: 舒思 时间: 2017-2-4 09:27

这个贴好像之前没见过

作者: happyboy 时间: 2017-2-13 19:38

不要等到人人都说你丑时才发现自己真的丑。

作者: laoli1999 时间: 2017-2-17 10:53

我十目一行也还是看不懂啊

作者: xm19 时间: 2017-3-27 16:52

好人一生平安

作者: 分子工程师 时间: 2017-4-16 19:14

一个子没看懂

作者: xm19 时间: 2017-5-2 17:49

不错不错,我喜欢看

作者: 王者之道 时间: 2017-5-3 23:54

快毕业了希望有个好工作干细胞还是不错的方向

作者: ringsing 时间: 2017-5-7 10:54

正好你开咯这样的帖

作者: na602 时间: 2017-5-17 12:53

(*^__^*) 嘻嘻……

作者: 知足常乐 时间: 2017-6-18 15:39

干细胞研究非常有前途

作者: laoli1999 时间: 2017-6-19 07:01

拿分走人呵呵，楼下继续！

作者: 追风 时间: 2017-6-20 03:50

哎怎么说那~~

作者: dataeook 时间: 2017-6-30 09:01

呵呵大家好奇嘛来观看下~~~~

作者: xm19 时间: 2017-7-24 20:17

拿分走人呵呵，楼下继续！

作者: 蝶澈 时间: 2017-8-14 09:35

我毫不犹豫地把楼主的这个帖子收藏了

作者: 化药所 时间: 2017-9-3 08:49

我在顶贴~！~

作者: biobio 时间: 2017-9-13 17:34

表观遗传学

作者: changfeng 时间: 2017-9-19 07:35

支持你就顶你

作者: 安安 时间: 2017-9-21 11:43

顶你一下，好贴要顶！

作者: htc728 时间: 2017-9-30 13:38

不错的东西持续关注

作者: qibaobao 时间: 2017-9-30 23:02

造血干细胞

作者: bioprotein 时间: 2017-10-3 04:58

哈哈,顶你了哦.

作者: 依旧随遇而安 时间: 2017-10-13 03:10

21世纪，什么最重要——我！

作者: cjms 时间: 2017-11-6 09:01

你加油吧

作者: dd赤焰 时间: 2017-11-12 04:42

小心大家盯上你哦

作者: qibaobao 时间: 2017-12-9 00:52

彪悍的人生不需要解释。

作者: marysyq 时间: 2017-12-10 02:36

似曾相识的感觉

作者: dmof 时间: 2017-12-10 19:42

一个有信念者所开发出的力量，大于99个只有兴趣者。

作者: dypnr 时间: 2018-1-20 19:54

干细胞研究还要面向临床

作者: s06806 时间: 2018-2-10 08:27

做对的事情比把事情做对重要。

作者: tian2006 时间: 2018-2-12 09:01

风物长宜放眼量

作者: 墨玉 时间: 2018-2-25 05:01

干细胞研究还要面向临床

作者: 老农爱科学 时间: 2018-3-14 04:08

间充质干细胞

作者: happyboy 时间: 2018-3-27 16:39

干细胞研究人员的天堂

作者: aliyun 时间: 2018-4-9 23:51

孜孜不倦，吾等楷模 …………

作者: dongmei 时间: 2018-4-12 00:01

好好帖很好帖确实好帖少见的好帖

作者: 心仪 时间: 2018-4-18 20:54

呵呵那就好好玩吧~~~~

作者: htc728 时间: 2018-4-24 07:42

先顶后看

作者: netlover 时间: 2018-4-26 03:51

干细胞行业门户干细胞之家

作者: 蝶澈 时间: 2018-4-30 04:58

做对的事情比把事情做对重要。

作者: 再来一天 时间: 2018-5-11 02:55

谢谢分享了!

作者: 生科院 时间: 2018-5-27 20:55

呵呵，找个机会...

作者: dmof 时间: 2018-5-29 19:26

真是汗啊我的家财好少啊加油

作者: ladybird 时间: 2018-6-6 22:19

支持一下吧

作者: pengzy 时间: 2018-6-28 20:40

好帖子，要顶！

作者: netlover 时间: 2018-7-2 08:27

好困啊

作者: yunshu 时间: 2018-7-10 23:10

不知道说些什么

作者: 碧湖冷月 时间: 2018-7-12 16:43

哈哈，看的人少，回一下

作者: dada 时间: 2018-7-17 20:51

楼上的稍等啦

作者: 风云动 时间: 2018-7-28 02:08

谢谢分享了!

作者: dada 时间: 2018-8-2 23:53

宁愿选择放弃，不要放弃选择。

作者: 锦锦乐道 时间: 2018-8-12 00:05

不管你信不信，反正我信

作者: heart10 时间: 2018-8-13 06:53

快毕业了希望有个好工作干细胞还是不错的方向

作者: 桦子 时间: 2018-8-16 05:22

琴棋书画不会，洗衣做饭嫌累。

作者: doors 时间: 2018-8-22 14:50

拿把椅子看表演

作者: aakkaa 时间: 2018-9-20 16:54

干细胞研究重在基础

作者: 张佳 时间: 2018-10-2 11:54

加油啊！！！！顶哦!!!!!

作者: 风云动 时间: 2018-10-7 12:26

回个帖子支持一下！

作者: 张佳 时间: 2018-10-8 00:15

谁都不容易啊 ~~

作者: xiaomage 时间: 2018-10-8 04:23

怎么就没人拜我为偶像那?? ~

作者: ringsing 时间: 2018-10-22 20:04

支持~~

作者: apple0 时间: 2018-11-15 19:09

勤奋真能造就财富吗？

作者: chongchong 时间: 2018-11-24 18:46

支持一下吧

作者: 求索迷茫 时间: 2018-11-24 23:08

不错，支持下

作者: xm19 时间: 2018-12-5 06:41

感謝樓主干细胞之家真的不错

作者: renee 时间: 2019-1-1 09:42

干细胞我这辈子就是看好你

作者: wq90 时间: 2019-1-27 07:04

呵呵都没人想我~~

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