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标题: 脐血间充质细胞培养出现细胞团块 [打印本页]

作者: henryjia    时间: 2016-9-1 03:03     标题: 脐血间充质细胞培养出现细胞团块

请各位专家给点建议,什么原因造成脐血间充质细胞培养出现漂浮的细胞团块。贴壁细胞却很少。[attach]79938[/attach][attach]79938[/attach][attach]79938[/attach][attach]79937[/attach][attach]79937[/attach]
作者: henryjia    时间: 2016-9-1 03:07

左边是4x镜头,右边10x镜头拍摄。9 }6 P+ D0 H& }! d, B

- `/ w! S; o! j0 P- H: H8 _3 M原代细胞培养中发现,脐血单核细胞形成悬浮的10个细胞左右细胞团块,随时间延长而增大。
作者: 奇幻雪蓝    时间: 2016-9-1 08:34

本人表示脐血间充质干细胞培养从来没有成功过!
作者: xyh脚印6025    时间: 2016-9-1 08:44

养过脐带间充质,没养过脐血的
作者: 叶未落    时间: 2016-9-1 09:13

只做过脐带的
作者: chelran    时间: 2016-9-1 09:28

那应该是T细胞增殖形成的clump,脐血间充质干细胞本来含量就很少。
作者: Jiangshi90    时间: 2016-9-1 12:51

回复 叶未落 的帖子
% A7 u4 d8 _7 p3 `: d% A; w) A
8 ~+ @- b6 i: Z* d, |亲,求protocol~
作者: gondobar    时间: 2016-9-1 15:02

脐血干你怎么养的?你的图片像免疫细胞。
作者: henryjia    时间: 2016-9-1 15:51

回复 chelran 的帖子
( C( e4 e% J8 `. \/ Q( u
# Y% N2 @) B0 L- N  i7 |难不成MSC没养出来,整出T细胞了/ ?9 w1 a/ a' e% }

9 b# S8 H2 K3 o$ X/ Y. K2 e您有什么建议可以抑制T细胞或者其他免疫细胞吗?+ Z6 J! q/ w! ^4 d: ?& H) E

, ^1 l9 M- y! S0 l1 s* T
作者: baby00000003    时间: 2016-9-1 16:01

先测一下原始细胞里面的CD73/90/105有多少吧~
3 M, i" W" L1 I# X3 ^& w; g" B直觉血液里面的间充质不会很多,需要用一些个方法给它富集了,磁珠之类的...
作者: 只因偶然    时间: 2016-9-1 16:51

明显就是免疫细胞增殖形成的集落嘛,脐带血间充质干细胞不用免疫磁珠法分离间充质干细胞是很难培养的,量少,未成熟单个核细胞、淋巴细胞、粒细胞那么多,养不起来的,即使有少量贴壁细胞,也很有可能是树突细胞而不是脐血间充质细胞。
作者: henryjia    时间: 2016-9-2 05:59

回复 只因偶然 的帖子& G1 P$ E( P$ o5 Z8 E5 m& R
' n5 E% Z$ Y( X* p5 q$ [- t- A
免疫细胞不需要特定的生长因子,只需有血清存在就可以生长吗?我的培养基只添加了FGF2
作者: 独自等待    时间: 2016-9-6 11:04

红细胞去除不够彻底,大量红细胞残留导致MSC很难贴壁并生长,建议培养前期4-10天全量换液。
作者: 121qwq    时间: 2016-9-8 09:31

脐血间充质做得不多
作者: cuijiaoyan    时间: 2016-9-13 09:45

聚集成细胞团的是淋巴细胞,淋巴细胞是悬浮细胞,可以通过多次弃上清来去除淋巴细胞,多换几次MSC就纯了,脐血分离的MSC很少,扩增几天就多了。
作者: 金戈    时间: 2016-9-18 17:35

回复 henryjia 的帖子- c0 b- @3 r; ^1 X- {2 O

. e2 ?7 V5 J3 P! j. G1 E这些细胞克隆都不是MSC,都是T细胞团。脐带血内含有的MSC数量本来就少,这些悬浮的细胞换液将其弃之(如果你只做MSC的话)。如果做免疫细胞的话,可以使用之。
作者: ltickp    时间: 2016-9-20 10:16

培养流程正常的话,漂浮的细胞可能不是UCMSC,MSC鉴定标准有三点:可塑黏附性;除内皮细胞、造血细胞外间充质细胞表型;分化能力。  考虑看看bFGF吧




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