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标题: 培养干细胞出现的问题 [打印本页]

作者: 傲娇的实验员    时间: 2016-9-6 14:41     标题: 培养干细胞出现的问题

用最大倍数的显微镜观察,里面有大小跟细胞一样会来回穿梭的虫子类似物不知道是什么东西   请问这里有知道的吗  是怎么产生的   要怎么避免或者消除   传代之前是没有什么的  后面可能家的培养基有问题还是说胎牛血清有问题  这个就不是很清楚了
作者: yingfeixiang    时间: 2016-9-6 15:36

回复 傲娇的实验员 的帖子3 e1 H9 i3 C' Z. x! f+ ]4 Q

- G2 f7 E' E/ U污染了吧
作者: 伊诺强    时间: 2016-9-6 15:37

擦!初步确定染菌了!!!可能是杆菌(阴性菌),可进一步检测内毒素确定到底是不是。祝你好运。。。
作者: 奇幻雪蓝    时间: 2016-9-6 16:01

那就扔了吧,好吗?
作者: 理科小文艺    时间: 2016-9-6 16:13

以前做实验遇到类似黑胶虫的污染,和你说的这个有点像。杆状菌和黑胶虫在形状上就不同,前者看起来很像杆状,后者更像虫子,且运动很快。
作者: qinchuanniu    时间: 2016-9-6 16:24

回复 傲娇的实验员 的帖子: ~! K  ^& c' \4 x' v1 a
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是否在镜下观察到培养皿(瓶)中有黑色的不太规则的东西,并有布朗运动,如果是这样的话,可能是细胞培养中常常讲到的“黑胶虫”,究竟是什么说法很多,似乎也没有定论,可查阅此方面的文献。
作者: 漾轩    时间: 2016-9-6 17:30

以前最开始做干细胞看到瓶子里面有很多漂浮的黑点点,还以为污染了,后来才晓得是因子
作者: Llxue    时间: 2016-9-7 15:37

黑胶虫我以前遇到过,虽然这东西是否存在有很多争议,但也在此跟大家分享我当初遇到的大概情况,黑胶虫刚出来前期只是小黑点,做不规则运动,和细菌大小差不多,也不影响细胞生长,培养基也不会像细菌污染那样变浑浊,后面慢慢的就会从小黑点长成一条链状串珠线,也是不规则运动,长多了之后细胞就会慢慢凋亡裂解,我们当时把细胞全扔了的
作者: echizne    时间: 2016-9-9 10:55

细菌污染了。检测一下同批培养基和血清吧。
作者: Quiet    时间: 2016-9-11 10:51

回复 漾轩 的帖子
* Z( K" e& P6 G% j$ h0 i
* q1 m! c  T7 X) ^0 Y  Y' E2 u有图片吗?养过一些细胞,镜下经常会见到一些黑色的东西,有些圆形,有些长条形的,培养一段时间会自己消失,一直不确定这些黑色的东西是什么
作者: 傲娇的实验员    时间: 2016-9-12 09:35

回复 Quiet 的帖子
, L/ L) G- s5 O
3 U- v6 @- y& h  l; L- |5 ?有图片。。。。我发楼里
作者: 傲娇的实验员    时间: 2016-9-12 11:35

回复 Quiet 的帖子0 G" a& M$ t5 Y$ |2 |
; c2 r8 H; U2 Y. @
。。。。怎么发图片。。。。
作者: cuijiaoyan    时间: 2016-9-13 09:28

有图片吗?个人觉得革兰氏或瑞士染个色,是细菌的话能看出来的。
作者: 傲娇的实验员    时间: 2016-9-13 13:33

哪位好汉告诉我怎么发图片
作者: 细胞海洋    时间: 2016-9-13 14:20

回复 傲娇的实验员 的帖子+ t6 m+ [0 \$ @. _) M* b4 A5 h

# _( v) [& B+ P$ r发帖或者回复 高级模式 有个曲别针似的按钮 点击 附件上传 单个图片不要大于1000kb
作者: 刘小明    时间: 2016-9-18 15:16

你可以封口继续培养,但只是作为鉴别是否污染,如果增多就是污染,因为我之前遇到过这种情况,多数是被污染了。
作者: 傲娇的实验员    时间: 2016-9-19 09:25

回复 伊诺强 的帖子
2 c+ k: h3 D) p9 g. T  ^
5 C7 N; G0 J" H" c/ ^8 F* x内毒素和支原体都没有问题
作者: xieyun20052005    时间: 2016-9-19 16:54

如果是加了牛血清了,可能是黑胶虫,可以换好一点的血清,也可以直接换成无血清培养基,现在已经很多厂商了。LONZA,JUNKE
作者: kiss2346    时间: 2016-9-20 10:07

以前养CIK时候刚分离单个核时候也发现过类似的情况。培养几天都裂解了,当时怀疑是杂质细胞,到现在也不太确定是什么东西
作者: 漾轩    时间: 2016-10-26 21:05

回复 Quiet 的帖子3 f: w9 F7 v* {# P. W
' G) h9 {+ X4 C+ v8 N: W; K6 V
我还没遇到过污染的情况呢,只是些小黑点
作者: echizne    时间: 2016-10-31 16:07

黑胶虫
作者: ccfc    时间: 2016-11-1 11:27

回复 Llxue 的帖子& z# b$ {& |3 r

0 E7 K5 _1 b; @/ b1 }7 b之前养过间充质干细胞,培养过程中发现有的细胞会往外吐黑色的物质,培养基在显微镜下观察会发现有黑色的小点,但是并不会动.
作者: ccfc    时间: 2016-11-1 11:28

回复 漾轩 的帖子
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) R2 |( r" m% t% X9 |( H2 _是什么因子呢?
作者: 何如    时间: 2016-11-1 14:01

如果黑点会动的话,估计是污染了,但是不会动的话,估计是细胞老化分泌的物质
作者: 莫邪小仙    时间: 2016-11-4 15:57

肯定是污染了




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