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标题: 新手求教，实验室没有人做这个啊==心好累。。 [打印本页]

作者: zhangzhen 时间: 2016-9-21 12:00 标题: 新手求教，实验室没有人做这个啊==心好累。。

1、诱导iPSC
需要多次AP染色鉴定，那么AP染色后细胞还可以继续养吗？还是说要把传几瓶细胞，每次专门拿一瓶做染色鉴定？还是每次消化一点细胞拿出来染色？
2、现在大家都还是用的经典四种因子病毒载体诱导吗？
3、具体怎么鉴定iPSC诱导成功啊？4 h3 M, u6 E0 r9 t
跪求指导:'( :'( 给跪了！！！

作者: zhangzhen 时间: 2016-9-21 12:01

不能沉自己顶

作者: zhangzhen 时间: 2016-9-21 12:01

再顶！

作者: zhangzhen 时间: 2016-9-21 12:07

顶啊啊啊啊啊啊

作者: zhangzhen 时间: 2016-9-21 12:09

老师自己都没做过怎么就想做这个了0-0
他觉得简单啊啊啊啊啊啊啊
站着说话不腰疼啊。。。。
老师腰好啊。。。。

作者: zhangzhen 时间: 2016-9-21 14:07

顶起啦. G& R0 t# R* ~# i2 q; `5 N7 `! y/ L7 K

作者: zhangzhen 时间: 2016-9-21 14:07

要屎了

作者: kiss2346 时间: 2016-9-21 14:53

原来做IPS的时候都是一个团队做这件事情，单打独斗劝你还是算了

作者: UlissesJR 时间: 2016-9-21 17:32

没做过这个，资料查的降低培养环境的氧浓度可大幅提高ｉＰＳ细胞生成的效率，还有天然化合物维生素Ｃ可促进鼠ｉＰＳ细胞和人ｉＰＳ细胞的生成，诱导率可提高１０倍。这些成果对促进ｉＰＳ细胞的研究和应用具有积极意义。

作者: wangxiang 时间: 2016-9-21 20:37

1你是在做人的还是鼠的，染色之后没法继续培养，你每次传代都有很多细胞吧，染色也就24孔板的一个孔细胞，不需要太多细胞量。
2.目前用慢病毒之类的整合的方式重编程比较少了吧，都是用电转或是sandai这一类非整合的重编程方式，具体你要自己做的话建议直接看看LIFE加sandai2.0的重编程方式，不过很贵.....; z/ n" W l/ f
3iPS的鉴定通常就是核型、免疫荧光染色、畸胎瘤这三种，当然也可以做甲基化检测，和安全性检测。

作者: zhangzhen 时间: 2016-9-28 20:56

回复 wangxiang 的帖子/ y. y/ m6 Q) _/ }4 o
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谢谢啊！我还想问一下，我打算做AP染色、流式和mRNA检测，可以代替核型和畸胎瘤吗？

作者: zhangzhen 时间: 2016-9-28 21:02

回复 kiss2346 的帖子
1 k6 Z( B" i: Z
就算难做也肯定得做啊:(9 r/ a& ?+ J/ R7 z9 m, I
虽然我也不敢肯定实验最后能带来什么样的价值，但是不做是肯定不行的:(

作者: wangxiang 时间: 2016-9-29 15:49

回复 zhangzhen 的帖子: j' I. U4 Z$ D/ O5 R8 V4 D* B
9 ], t) G4 {, O5 P4 c
说明的问题不同吧，没有代替不代替的。染色、核型、畸胎瘤是大部分人的选择。

作者: zhangzhen 时间: 2016-10-3 11:58

回复 wangxiang 的帖子

这样啊谢谢啊！

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