干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 间充质干细胞老化问题 [打印本页]

作者: ccfc 时间: 2016-10-31 13:57 标题: 间充质干细胞老化问题

间充质干细胞，在培养过程中并不是长梭形，有较多的触角，而且细胞核周围可见颜色较深的黑点，有些细胞可以看到往胞外突出小颗粒，请问可以按照这些指标来判断细胞老化吗？如果更换新鲜配制的培养基能改善细胞状态吗？

作者: zhouweixing000 时间: 2016-10-31 16:20

在间充质干细胞培养的过程中如果没有选择好合适的培养环境或者培养前没有做好充足的准备工作就很容易出现细胞的老化现象，这是间充质干细胞培养的难点之一更是在实验中经常遇到的问题。干细胞的老化一般表现为以下现象：
2 \& |" J( L- ^2 K" U! x( O. n
1.细胞老化最开始的现象通常为在细胞浆内特别是在核区附近会出现黑色颗粒；

2.老化以后的细胞会出现立体感慢慢消失，开始成扁平状，细胞与细胞之间的间隔减小或混在一起，细胞不再为梭形会成为各种不规则形状；9 V; i" g' @+ w& j' v8 y
5 b3 R5 p3 d+ l
3.细胞的贴壁性减弱，开始有细胞漂浮于培养液中；9 O7 f2 Z# _( j/ ^
! {! J/ S$ }3 u* K. @* l% E7 Y
4.分泌强的细胞的会出现更多的分泌物，细胞表面的纯净度越来越低；
; W; s1 ~$ _  w4 {0 c3 ?% c
5.分裂的细胞数量明显的减少同时细胞的增值速度也会大大下降。

对于细胞老化的原因分析及预防和处理方法：
8 Q' j* M  Q' {; k
1.接种密度不当。一些干细胞具有独特的分泌性，会产生一种能细胞因子支持干细胞的生长，因此在培养时要注意接种的密度如果密度不合适就会导致细胞的生长速度过缓，最终导致细胞的老化现象出现。# p! V' I, [% }7 o& F
( h( M4 r7 a! j0 ^
2.消化时间过长。在间充质干细胞培养时必然要进行消化，但是消化对细胞的表面蛋白质有很强的破坏作用，因此不能长时间进项消化并且在选择消化酶时也要选择较为合适PH至和浓度，不然就会使细胞老化或者分化。: X/ j. }  F$ j9 ~& V6 Y6 K# }
- B5 I* i1 U9 ^" l
3.达到标准密度后必然要传代。细胞在生长一段时间后密度就会越来越大，等到合适的密度时就要进行传代不然就会因为细胞国密而导致生长缓慢移植细胞的活性，从而使细胞老化。
+ t4 C& t5 E5 {2 C# W
4.选择正确的血清与培养基：细胞进行的阶段不同所使用的血清和培养基也都不相同，一定要选择适合的培养基不然就会因为营养物质不协调而导致细胞老化。中赛生物技术有限公司可以提供相关的技术服务并且为大家提供合适的间充质干细胞原代培养基与传代培养基，这些产品能够帮助实验人员快速高效的研究制造细胞。) A' p- a& ], k$ h! Z) x

作者: jxsese 时间: 2016-10-31 23:08

mark

作者: ccfc 时间: 2016-11-1 11:23

回复 zhouweixing000 的帖子
+ T- [& K7 p! I+ a8 H5 `( z7 S' J; J6 s
感谢指教，学到了很多，谢谢# e9 {/ N! v5 K! \3 D
我目前养的细胞，在十倍镜下还是很有立体感的，但是4倍和40倍基本都是扁平的。之前有查过细胞内黑色颗粒的问题，有的说细胞内黑色颗粒多也可能是细胞增殖旺盛，各种酶和核糖体含量丰富所致，有的说是细胞老化，所以很困惑。细胞增殖速度还可以，就是形态很不好，即使是第三代的细胞也出现您所描述的老化现象。
请问您所提到的【细胞进行的阶段不同所使用的血清和培养基也不同】，有什么好的产品可以推荐的吗？

作者: 蒙牛一头牛 时间: 2016-11-3 13:35

回复 zhouweixing000 的帖子0 V7 E! X- @' H% k& O' d& E
7 W. Y3 U7 Z/ p/ j$ R. U
谢谢你，用心了。

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)