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标题: NKM细胞接种培养后转175瓶，转培养袋的依据 [打印本页]

作者: ltickp 时间: 2016-11-2 16:31 标题: NKM细胞接种培养后转175瓶，转培养袋的依据

养NKM细胞，先分血得PBMC，在接种到75瓶子里样，然后在转175瓶，最后转袋；判断细胞需要转175瓶、转培养袋的依据是什么，或者说是免疫细胞在体外培养得生长特性

作者: chrcs 时间: 2016-11-2 16:37

看接种密度吧，一般是显微镜视野下细胞大约长满整个视野，就开始转瓶或转袋了

作者: LVXUEYAN1101 时间: 2016-11-2 16:56

接种密度，可以通过计数来判断也可以直接镜下观察密度来决定是否传瓶或转袋

作者: UlissesJR 时间: 2016-11-2 17:03

看培养液，看细胞团大小，数量

作者: 修行 时间: 2016-11-2 17:28

细胞数量。根据密度，算出体积，根据体积算出所使用的容器。前提是你的细胞数量和形态都要不错。

作者: chmgzy 时间: 2016-11-2 22:03

按补液后的密度1~2×10^6/ml，体积达到40ml转T175瓶，体积达到200ml转2L培养袋。

作者: ccfc 时间: 2016-11-3 13:02

他想问的应该是肉眼观察判断的依据，如何在细胞生长最快的时候转瓶转袋，补液，如果培养过程中混匀取样的话会影响细胞的生长状态，但是不混匀的话代替不了整瓶细胞的密度；NKM培养细胞会有细胞呈细胞团生长，刚开始细胞团数量会增加，尤其是大的细胞团，之后细胞团散开变成小的细胞团；关键是如何判断细胞在那个状态时细胞生长速度最快

作者: woshibotao_01 时间: 2016-11-3 15:14

最好是严格按照细胞计数，根据以往的经验只凭观察误差太大，接种密度不对肯定影响后续

作者: 阿秀哥 时间: 2016-12-1 10:13

主要从细胞密度这方面考虑

作者: xieyun20052005 时间: 2016-12-1 16:44

细胞生长合适的密度是最关键的，密度太低细胞不长，密度太高会有接触抑制，在合适细胞生长的密度下一般T细胞是1~2*106，计数算需要稀释至多少体积，T75瓶一般最多可以容纳60ml培养基，一般5~7天后体积就会超出60ml，这个时候就需要转进T175瓶内，同理T175瓶可以最多到250~300ml，根据细胞密度计算的体积超过这个体积，就需要转进袋子里面，一般的话袋子都是1.8L的，装进去1600ml就差不多了，太满了看着也危险。

作者: hwlightning 时间: 2017-9-26 16:49

NKM是什么细胞？？？

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