干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 细胞冻存密度 [打印本页]

作者: honey棉花    时间: 2016-11-18 16:58     标题: 细胞冻存密度

用含10%的DMSO冷冻保护剂冻存细胞,总体积1ml,最佳的细胞冻存密度是多少?如果细胞多或者少了,对细胞会有影响吗?我们从0.5-6*10^6都冻过,解冻后,细胞生长良好,没有很明显的差别。
作者: gxbzjznn    时间: 2016-11-18 22:16

z这个没有绝对的吧,要看具体细胞类型,一般来说,成体细胞要求不是很高,多一点少一点无所谓。但是干细胞不能太少!
作者: lchanlon    时间: 2016-11-19 05:03

Between 1 million to 10 million per ml freezing medium.
作者: 吃呆猫    时间: 2016-11-21 10:57

细胞密度80-90%时冻存,关键是要处于对数生长期的细胞就行
作者: niliu730323143    时间: 2016-11-22 10:41

10^7/ml左右,一般我是按照1:5的量去冻,不用计数。
作者: 风倾颜    时间: 2016-11-22 15:20

细胞铺满瓶底80%-90%之间冻存比较好,我们一般都是冻存5*10^6左右,这样复苏后细胞比较容易养起来
作者: 伊诺强    时间: 2016-11-22 15:31

这个要分是什么细胞。鉴于你目前的密度应该是常见的间充质或者免疫细胞。所以你可以试一下1到1.5 *10的7次方应该没问题。
作者: liuyanly35    时间: 2016-12-23 21:24

冻存密度在5*10^6个/ml~1*10^7个/ml,根据细胞大小而定,密度不要太高了,否则起不到保护作用,复苏的活率会降低,再就是冻存液也很关键。
作者: gscao    时间: 2016-12-24 08:17

这主要看个人经验,我们一般细胞铺满80-90%进行冻存,根据不同细胞要求进行传代,如1:3或者1:5传代。
作者: peng1281090563    时间: 2017-2-23 15:03

我们的成纤维细胞是2*10^6
作者: ltickp    时间: 2017-3-1 11:55

细胞类型不同,冻存密度不同;另外也要考虑计数结果准不准的问题
作者: ltickp    时间: 2017-3-1 11:56

细胞类型不同,冻存密度不同;另外也要考虑计数结果准不准的问题
作者: innatestem    时间: 2017-3-3 12:43

1.不同的细胞类型冻存时的细胞密度不太一样,可以是0.5百万---10 百万不等。' U3 Q5 Z: q. {9 k, Z
2.冻存的体积可以是1ml---1.5ml之间。体积过大的话会增加污染的几率。
  b9 t- G& W: }9 N1 D+ U3.细胞冻存时DMSO的最终浓度是10%左右。常用8%---10%。
% e* C6 ], H! X  E$ F: P4.特殊类型的细胞(比如干细胞,原代细胞等)在冻存时需要的细胞密度稍微大一些。
作者: hengton    时间: 2017-4-2 21:47

不同细胞类型的细胞冻存密度需要验证。5-10*106个都得验证,培养后看细胞扩增数量和目的细胞的指标等。取最合适的就行。再说了,现在的冻存液和冻存曲线都有差异,合适自己的就行。
作者: 细胞分裂    时间: 2017-4-5 09:54

请教一下,你说的细胞生长良好,没有很明显的差别,是怎么得出的结论呢,有没有做过数据统计,有没有做验证试验,有没有一定的代表性?




欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/) Powered by Discuz! X1.5