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标题: 最近提msc要提哭了，最近提的一瓶感觉有希望，大家帮我看看咋杨 [打印本页]

作者: 余生请多指教 时间: 2016-12-19 16:25 标题: 最近提msc要提哭了，最近提的一瓶感觉有希望，大家帮我看看咋杨

大婶们快来指导我，这是10倍下第五天的，用的方法为：150g左右sd大鼠，颈椎脱臼法处死，75%酒精中完全浸泡15min。无菌条件下取股骨、胫骨，完全培养基冲反复冲洗髓腔，双侧股骨和胫骨所得细胞平均接种入两个T25培养瓶，24h全量换液。[attach]82630[/attach][attach]82629[/attach][attach]82628[/attach][attach]82627[/attach]

作者: 基因疗法 时间: 2016-12-20 04:23

你在大腿取出细胞来后不用过滤网过滤吗？

作者: yunshi503 时间: 2016-12-20 08:05

应该是

作者: ytumuyangren 时间: 2016-12-20 08:13

但从细胞形态来看像大鼠的BMSCs，建议贴壁24h后半量换液。预祝实验顺利！

作者: pcljsw2008 时间: 2016-12-20 08:33

看起来还可以啊

作者: 阿秀哥 时间: 2016-12-20 09:10

感觉杂细胞很多的样子，梭形细胞很少

作者: 余生请多指教 时间: 2016-12-20 09:41

回复基因疗法的帖子$ ~( C, a5 W' B
' W1 q8 e' d! _% l6 P% g
没有过滤，就直接冲了

作者: 余生请多指教 时间: 2016-12-20 09:42

回复 ytumuyangren 的帖子9 q% C% y' A- {+ q8 [. ^9 l1 A* g2 T
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感谢指导

作者: 余生请多指教 时间: 2016-12-20 09:42

回复 pcljsw2008 的帖子/ \3 R0 X- r% g
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弄了一个月，终于看到有一瓶比较好了！！

作者: wzm123hzy 时间: 2016-12-20 09:48

冲洗完骨髓腔之后，需要离心。之前有大神提议尽量用淋巴细胞分离液进行密度梯度离心，这样分离出的骨髓干细胞会比较纯一点。希望对你有用，预祝实验成功！

作者: 余生请多指教 时间: 2016-12-20 09:50

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感谢

作者: wzm123hzy 时间: 2016-12-20 10:19

回复余生请多指教的帖子* v5 B4 @/ _2 C, K' Q- o

客气了

作者: 基因疗法 时间: 2016-12-20 12:27

余生请多指教发表于 2016-12-20 09:41
- C& x& D2 J: o( ~! _" S8 S, g5 ?回复基因疗法的帖子
( h" u; V% m- m6 H. b- t/ T
q- ~8 U" [. P没有过滤，就直接冲了

我在动物所周琦教授那里学过的是要用过滤网过滤一下，这样会纯很多

作者: dollar007 时间: 2016-12-20 14:53

杂细胞很多，建议细胞贴壁后换液，去掉杂细胞。

作者: 余生请多指教 时间: 2016-12-20 18:30

回复基因疗法的帖子8 U/ o; l( p9 l: w2 ?4 ?
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好的，感谢，我下一次试一试看看

作者: 蚂蚁上树 时间: 2016-12-21 13:20

个人感觉，酒精浸泡时间太长了，一般3-5分钟就好了。大鼠处死后应尽快将骨腔里的东西冲洗出来，不然会有大量凝块。

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