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标题: 麻烦各位帮我看看hMSCs细胞状态如何 [打印本页]

作者: zhaobing3034653    时间: 2017-2-21 09:48     标题: 麻烦各位帮我看看hMSCs细胞状态如何

本帖最后由 zhaobing3034653 于 2017-2-21 09:59 编辑
* h! X9 w5 p: |
: R4 [! Y" T* ^2 }麻烦各位帮我看看细胞有没有老化,或者分化什么的,感谢!% \) l- X( v- C7 q3 O& T: }
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作者: uslzhang    时间: 2017-2-21 10:37

正常。
作者: echizne    时间: 2017-2-21 10:44

keyi de
作者: Leo_yihan    时间: 2017-2-21 13:23

可不可以分享一下你的细胞培养条件?培养基?血清?生长因子等等。我的细胞养不起来,总是在第三代开始老化了。
作者: 淘知路遥    时间: 2017-2-21 16:35

正常的梭型、长条形,处在增殖期有细胞正在分裂
作者: zhaobing3034653    时间: 2017-2-21 23:25

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" P! R& |& A. X9 u& k这是个正常的啊?其实这个已经是第10代细胞了。我发现细胞当中存在一些黑点,这个是不是老化的标志?
作者: zhaobing3034653    时间: 2017-2-21 23:28

回复 Leo_yihan 的帖子' \' n1 ]& `1 \5 ?, F6 o
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其实我这个细胞不是自己提的,是从上海细胞库买的,因为我自己不擅长细胞方面的东西,想简单直接点。当时买回来的时候就是第4代了,培养基啥的都是买的细胞库现成的,你可以去细胞库的网站上看,配方都有,应该是ATCC的整套配方。
作者: cuijiaoyan    时间: 2017-2-22 08:36

有些微的老化,细胞有点长了,第四五代应该没有这么大,不过第十代长这样状态已经很好了。
作者: MCARS    时间: 2017-2-22 09:26

第十代的细胞这个状态算养的可以了,有些微老化,细胞的折光性变差,所以能看得见细胞内的代谢物
作者: zhaobing3034653    时间: 2017-2-22 16:23

回复 MCARS 的帖子' o, d- o% m# |) X, W. g
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请问,如果我用这样的细胞进行分化培养实验,还能行吗?
作者: Leo_yihan    时间: 2017-2-22 19:22

回复 zhaobing3034653 的帖子/ d" ^5 N5 B' V

+ |2 r# l# [; f. z- w* v好的,多谢~我们实验室需要自己提取、培养细胞,并且为了省钱没有买商品化的干细胞培养基,所以条件都要自己摸索
作者: zhu1019    时间: 2017-2-23 08:55

稍微有点老化,不过细胞状态挺好的,我们做诱导分化一般选择代次比较靠前的,比如P5代
作者: MCARS    时间: 2017-2-23 09:53

应该可以的,有文献报道间充质干细胞在体外培养到23代其全能性基因OCT-4,SOX-2,Nanog表达的mRNA含量都无明显差异,说明在传代培养过程中很好的保持了多向分化能力
作者: zhaobing3034653    时间: 2017-2-27 19:56

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* o4 E  o5 w1 \! S: |我现在也不想用买现成的培养基了,也想自己配。但是现在国内好像没有很好的血清了,GIBCO的胎牛血清好像也是高仿的,所以不知道血清从哪边搞。基础培养基是用a-MEM吗?
作者: Leo_yihan    时间: 2017-2-27 21:18

回复 zhaobing3034653 的帖子0 _+ V6 h4 _& X, f0 O
$ @: t6 Q# n2 _0 `! `
我看的大部分文献用的都是DMEM/F12培养基,GIBCO国外进口的现在要七千块左右一瓶,太贵了,好像Hyclon的血清也不错,价格稍便宜些。
作者: 121qwq    时间: 2017-2-28 11:10

hMSC是什么MSC?形态不错的
作者: 121qwq    时间: 2017-2-28 11:11

回复 zhaobing3034653 的帖子
1 L# |. L: `) C  B6 f
! p9 e. K& `9 m( m! b( o- j% y想问一下你是怎么传代的?每次都是6孔传6孔吗??买的是原代吗
作者: 121qwq    时间: 2017-2-28 11:12

hMSC是什么MSC?骨髓?脂肪?脐带血还是脐带?
作者: zhaobing3034653    时间: 2017-3-1 09:46

回复 Leo_yihan 的帖子: o9 Z, n+ a" K4 d+ F" d3 O! E3 r

' \8 ]$ u  ]& x- b哎?为啥我看的大部分文献用的都是a-MEM?Hyclon的哪种血清比较好?麻烦推荐下呗
作者: zhaobing3034653    时间: 2017-3-1 09:47

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hMSC就是人间充质干细胞
作者: zhaobing3034653    时间: 2017-3-1 09:48

回复 121qwq 的帖子
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- a0 `% U  I- E0 M; ^3 Z我是用T25培养瓶养的,一般就是一瓶传两瓶。没有用孔板传过代。没错,买的是上海细胞库的原代细胞。
作者: zhaobing3034653    时间: 2017-3-1 09:49

回复 121qwq 的帖子4 s( L2 m; I9 ^/ h

* o' @5 z& S5 f" f5 ^人的脐带间充质干细胞
作者: Leo_yihan    时间: 2017-3-1 21:21

回复 zhaobing3034653 的帖子! E* A1 e" D. D, q4 Z
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具体的我就不清楚了,我也是听说




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