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标题: 我的MSC怎么了？求大神指点！ [打印本页]

作者: Leo_yihan 时间: 2017-2-22 21:25 标题: 我的MSC怎么了？求大神指点！

全骨髓贴壁法分离的小鼠BMSC，分离24h后换液，培养基是DMEM/F12+10%FBS+双抗。这是第四天的细胞，长成这个鬼样子。。。% ^. C+ H6 A: Z. c* B* J' w) _
各位大神我分到的是MSC吗？如果是的话形态为什么不是长梭形的，而且有很多细胞呈扁平不规则形状。细胞内含物很多，可能是哪里出了问题？" w8 Z9 O6 t% L+ ~
另外我实验室的显微镜拍照软件有点问题，无论是像素还是颜色都有些诡异，辣眼睛，请见谅。。[attach]84083[/attach][attach]84082[/attach][attach]84081[/attach]

作者: chenguangyu 时间: 2017-2-23 08:10

支原体污染？

作者: zhu1019 时间: 2017-2-23 08:47

我们做的其他来源的原代MSC形态是会这样的，往后传几带形态就会变长梭形了。另外感觉背景很脏，不排除支原体污染的可能，如果细胞生长很慢的话，建议可以做个支原体检测。

作者: baby00000003 时间: 2017-2-23 09:13

这个形态挺正常的，要有耐心给它时间，融合率上去了，就能看出旋涡状了0 _7 M9 w4 @4 ?7 F+ f2 w+ { [
P0的可以考虑多加点血清，再加点EGF==之类的各种GF可能会长得更好一点

作者: Leo_yihan 时间: 2017-2-23 10:09

回复 baby00000003 的帖子4 m6 X6 x2 k7 Q2 I' V
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之前分离过一次，细胞长得很慢，形态一直都是这个样子，到P3代就老化了，基本不长，会是支原体污染吗

作者: cyl黄金杖 时间: 2017-2-23 14:48

我们做的其他来源的原代MSC形态是会这样的，往后传几带形态就会变长梭形了。另外感觉背景很脏，不排除支原体污染的可能，如果细胞生长很慢的话，建议可以做个支原体检测。首先确认是不是冻存问题。

作者: baby00000003 时间: 2017-2-23 15:03

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这我可不好断言，实在怀疑就检测一次呗～
如果是我，先换血清做个平行对照看看

作者: Diane0321 时间: 2017-2-23 20:50

培养基不用加bFGF吗？我们的MSC培养都会添加bFGF的

作者: Leo_yihan 时间: 2017-2-24 13:12

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6 A# f$ r" b8 b/ ?! [9 v# m& ]
看好多人都说不用加就可以养的很好，但是接下来我打算要加些了，不知道细胞长得会不会好点

作者: 121qwq 时间: 2017-2-28 11:13

没什么，杂细胞多了点而已

作者: Diane0321 时间: 2017-3-18 12:05

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不加的话很可能会营养不良哦，我觉得你可以试试加上bFGF看看

作者: 阿秀哥 时间: 2017-3-22 14:47

看起来感觉有很多的杂细胞

作者: shangshiwang 时间: 2017-10-7 19:19

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请问你们的bFGF是什么公司哪个货号啊，求分享。

作者: 壹DD 时间: 2017-10-15 22:00

排除培养箱二氧化碳浓度是否正常，用二氧化碳浓度仪测试一下；另种瓶要控制细胞密度，细胞两三天贴壁长起来，如有杂质，排除污染后可以半量换液试试

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