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标题: 求助：细胞老是有类似于“黑虫子”的污染 [打印本页]

作者: wenzi 时间: 2009-6-24 18:24 标题: 求助：细胞老是有类似于“黑虫子”的污染

大家好，我们实验室的细胞培养最近老是污染，是那种点状的黑色的小虫子，移动的非常快，细胞培养箱都清理了好几次都不行，不管什么细胞都会污染。请问有没有见过这种污染现象的啊，怎么解决呢？谢谢~

作者: have-a-rest 时间: 2009-6-24 19:25

培养基、细胞全部处理掉。先做好实验室、超净台、冰箱、培养箱的彻底消毒：细菌污染用84、新洁而灭、、紫外、75%酒精消毒，支原体污染需要甲醛熏蒸。如有可能，还需要更换排、进气滤膜（包括培养箱、工作台、空间等）。
一切没问题后，重新开始实验：全新的无菌培养基、来源可靠的细胞株。实验操作过程注意无菌操作。3 O+ }7 ^4 g0 Y( G' k0 _- C4 V! W
祝顺利！

作者: wangming 时间: 2009-6-24 21:50

试一试无血清培养，可检查血清效果。

作者: sailboat 时间: 2009-6-25 08:59

最好检查一下血清里是不是干净的
建议污染的细胞就不要再放进细胞培养箱了，继续放着就会使其他的细胞也受到感染

作者: cortex 时间: 2009-6-25 11:02

这种情况，一般要把你的细胞扔掉，对培养箱进行清洗消毒，如果还是出现上述情况，就要对你的培养基，血清做检查。你可以不加细胞，直接将你的完全培养基在清洗消毒后的培养箱放置过夜看看有没有上述情况。/ }/ S( P. M$ R2 ^/ c) g; q3 U
不过，最好还是把培养间内所有的设备及空间进行彻底消毒最安全。

作者: medusa75 时间: 2009-6-30 09:13

先只培养一下培养基看看吧

作者: dragon513 时间: 2009-7-8 22:22

我们也污染过，浅薄的经验告诉我们，如果没有把握培养箱、培养室、所有所具均彻底消毒，如果允许最好停试验一周左右。

作者: archangels 时间: 2009-7-12 18:01

实验室以前出现过，猜测是不是传说中的黑胶虫，设备消毒，换试剂。baike.baidu.com/view/1457791.html

作者: yezi_830823 时间: 2009-7-20 17:55

我的细胞也有过类似的黑色的东西在培养基里移动,培养培养基后发现培养基是正常的。我的解决办法是将配好的培养基用0.22的滤器过滤，再进行培养后培养基里很干净。你可以试一试

作者: flyingpnmc 时间: 2009-7-20 20:53

一旦出现上述污染情况：3 r# Q# }0 H3 I2 a3 O& b
1、彻底消毒培养箱、超净台（看高效过滤器是否需要更换）、离心机、水浴锅等设备；
2、清除原有的可疑细胞；
3、检测培养基、血清等试剂是否有污染；
4、彻底消毒移液器；* M; \, G+ W' m1 Y7 t8 l, I, {1 g
5、检测灭菌锅是否达到灭菌要求；! q' T7 R8 d7 R0 i
6、培养瓶、移液管等最好使用一次性耗材，如果条件不允许，一定要用符合要求、清洗干净、灭菌彻底的耗材；
7、定期更换培养箱、水浴锅内的水；搞好实验室卫生等。

作者: xiaoli 时间: 2009-10-31 22:22

我们培养的细胞也是有黑点点的东西，但是没有移动啊，不知道是什么东西

作者: 烂桃 时间: 2009-11-2 10:33

本帖最后由烂桃于 2009-11-2 10:36 编辑 6 A# i2 U. h y% z9 z
5 O7 X! ?) Z2 g& l3 U# Z
可能培养基污染了，或者细胞本身被污染，培养箱也要清洗过后在干灭

作者: mbjane 时间: 2009-11-2 23:59

学习了

作者: xuliangytu 时间: 2009-11-3 12:31

thanks

作者: shmily_1 时间: 2009-11-18 20:25

血清融化时，不要用温水，4度化开再用

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