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标题: bmsc的一些问题 [打印本页]

作者: 余生请多指教 时间: 2017-3-23 10:22 标题: bmsc的一些问题

图里这些黑的是什么啊，提的原代就有！！！，提取为简单的取骨，培养基冲，然后24h换液，以后2天一次，体系为10%fbs+双抗+培养基
还有消化的问题，0.25胰酶预热，pbs洗一遍，然后加入1ml胰酶消化，显微镜下5分钟为何还没有消化下来
msc折腾了好久了，，导师天天都在催T-T，求战友帮忙分析哈( P7 {2 U# ?7 z. A l2 x
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作者: laputa 时间: 2017-3-23 14:20

黑胶虫污染了吧

作者: cuijiaoyan 时间: 2017-3-24 09:34

建议FBS换进口的，这种现象就没有了

作者: liuyunmeng2002 时间: 2017-3-24 13:09

像是污染了

作者: xufeng8686 时间: 2017-3-24 16:54

换血清试试

作者: 金鹏 时间: 2017-3-24 17:45

看你这图更像是焦距不对，一般即便是黑点也没有这么黑。你先确定一下是不是瓶子内部的，如果是内部的你使用血清前离心一下，可能是血清里的。不像是微生物污染之类的。消化不下来的话建议你换一下你的消化液，正常情况下5分钟的消化算是就一点的了，如果消化不下来可能是消化液的问题。

作者: flylover1221 时间: 2017-3-27 14:22

首先，楼主照片不太清晰，焦距太近了，曝光太强了，根部看不清楚；0 d8 H/ n$ Q" x0 W$ Q& b3 O
其次，原代培养骨髓间充质，出现底部黑色的小点，如果在高倍镜下会动，可能是黑胶虫污染，考虑更换血清；如果不动，但能随着培养基的晃动飘动，应该是附着的死去的血细胞，尽量换液彻底，PBS清洗后再补加培养基。

作者: 124152828 时间: 2017-3-28 22:33

BMSC还是蛮容易消化的，常温下0.25%胰蛋白酶也就2-3分钟就差不多了

作者: xiaoyuwsp 时间: 2017-3-28 23:54

黑点点确实像没有对到焦，没在细胞层面上；消化反应与酶液浓度、加入比例、消化温度、消化时间等很多因素有关

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