干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 小鼠的脂肪间充质干细胞做流式鉴定怎样去除细胞黏连问题?求指教 [打印本页]

作者: zhouyonhzhan    时间: 2017-4-8 09:17     标题: 小鼠的脂肪间充质干细胞做流式鉴定怎样去除细胞黏连问题?求指教

小鼠的脂肪间充质干细胞做流式鉴定怎样去除细胞黏连问题?求指教
作者: cuijiaoyan    时间: 2017-4-10 08:35

上机前过滤或吹打一下看行不行
作者: 阿秀哥    时间: 2017-4-10 11:11

可以吹打试试
作者: 2357710447    时间: 2017-4-10 16:44

细胞的量不要太大     也可以过滤      上机前适度摇晃
3 q' u( F! y; K& R! j  u: r
作者: zhouyonhzhan    时间: 2017-4-11 09:46

回复 cuijiaoyan 的帖子$ Z/ V6 U. S0 G. y, {1 _

# Y! T+ q# U, P5 J做流式细胞总是压在两个坐标轴上,且做不出阳性结果。请问大神是什么原因?
作者: zhouyonhzhan    时间: 2017-4-11 09:46

回复 2357710447 的帖子
+ h, ^, r5 g8 t2 x1 U8 Q
; O/ C( G2 V: s) N# L) l做流式细胞总是压在两个坐标轴上,且做不出阳性结果。请问大神是什么原因?
作者: cuijiaoyan    时间: 2017-4-11 16:01

回复 zhouyonhzhan 的帖子- T$ h, v% [! [9 {: H

, u, A% i8 L: H% V+ C) F+ u( ]. j- d流式的门设置没问题的话,考虑一下抗体的问题。
作者: 2357710447    时间: 2017-4-12 09:11

回复 zhouyonhzhan 的帖子
7 C0 F) U3 e1 E( }3 e1 G
  a+ @& B4 x. }5 w0 }上个图片看看     可能是做流式的模板上某些值没有设置正确或者是没有设置、有可能是M值
作者: zhouyonhzhan    时间: 2017-4-12 09:44

回复 cuijiaoyan 的帖子" q1 I6 _% `% Y; d  K( l7 ?
. I; G; i3 \- N/ n, B4 }
我们用肌细胞检验了一下抗体没有问题。但是检测们的脂肪间充质干细胞全压在两个坐标轴上,检测的阳性指标和阴性指标一样表达很少。
作者: zhouyonhzhan    时间: 2017-4-12 09:49

回复 2357710447 的帖子9 r9 D$ P1 ^9 G# O

% ]4 O, ]* M/ o- n, O% U想问一下我们检测时用的单抗体CD44、 CD45 、CD3 CD90、CD105每管只有一万个细胞。会对检测结果有决定性影响?我们在怀疑自己方案和培养基的问题。比较着急
作者: 2357710447    时间: 2017-4-12 14:04

上样的时候每管几乎都两万以上,吸取的时候每都是吸取一万个,我做的和你们的有点差距
作者: 2357710447    时间: 2017-4-12 14:08

回复 zhouyonhzhan 的帖子) U1 M; s+ N/ t5 e& ^5 ^

$ ]+ F* |! y& Z, N0 ?& {8 C) j我觉得数量应该不会是你图像出错的关键原因   还是要找一下其它原因
作者: cuijiaoyan    时间: 2017-4-12 17:38

回复 zhouyonhzhan 的帖子
! b3 l9 \: H7 D% ]  ^6 c2 Y6 P' ]- C  O; g7 K
一个一个排除吧,抗体没问题,流式仪设置没问题的话,那就是细胞的问题了。可以找个别人的MSC作为阳性细胞,检测一下流式仪的设置是不是有问题,一般间充质阳性表面marker不会检测不出来的,除非你的细胞不是间充质,建议你上个细胞状态的图,大家帮你看看细胞。
作者: 刘小白and刘小黑    时间: 2023-10-12 14:21

流式去粘连在前侧向圈定主细胞群后,加一张A-W或者A-H的图,圈定密集区域就可以了,后续分析的细胞都来自于去粘连圈定的就好了。




欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/) Powered by Discuz! X1.5