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标题:
UC-MSC聚集
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作者:
esound11
时间:
2017-4-23 22:08
标题:
UC-MSC聚集
第一次尝试养UC-MSC，最近发现细胞呈现聚集生长的状态，然后就成球，细胞贴壁的越来越少，有的是第一代，有的是第三代，最近用的是无血清培养基，但之前培养的时候细胞生长的也很好，请问有没有哪位老师知道是什么原因？[attach]85656[/attach][attach]85655[/attach][attach]85654[/attach]
作者:
理科小文艺
时间:
2017-4-24 08:05
你这是加了双抗？估计是污染了
: |( |6 l) p2 d# n
作者:
木木木木
时间:
2017-4-24 08:22
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理科小文艺
的帖子
7 B& g8 w6 A: o8 Q' u
, k6 h( ]* O3 o* L) b7 w
加双抗有影响吗？
9 B/ s6 H* h8 W/ @+ Q1 k
作者:
五口二木
时间:
2017-4-24 08:42
这是养了多少天的了？UCMSCs时间一长就收缩变成球了
作者:
laputa12
时间:
2017-4-24 08:52
从含血清到无血清一般需要梯度过度，细胞得有一个适应过程
作者:
baby00000003
时间:
2017-4-24 10:03
无血清培养基几乎没有做的特别好的，有时候就是这个效果，
! X9 }! W" M; p5 M! _
试试换包被蛋白或者包被浓度吧～fibronectin、PDL、cellbind的瓶子，都试试，不一定非要用原装的包被液
作者:
gxbzjznn
时间:
2017-4-24 10:37
有些细胞在无血清状态下或者悬浮培养状态下会形成球状（以适应外界环境），譬如，神经干细胞，乳腺干细胞等！
作者:
wzs1985
时间:
2017-4-24 12:29
多试一试一些商业化的无血清培养基。
作者:
chimo100
时间:
2017-4-24 14:38
用好点的无血清培养基，直接从有血清培养状态，直接转到无血清培养状态，我刚做了，是没有问题的。不知道是不是你的无血清培养基问题
作者:
淘知路遥
时间:
2017-4-24 16:16
血清能提供促接触和伸展因子使细胞贴壁，从有血清到无血清需要一个过渡期，梯度减少血清量直至无血清
作者:
理科小文艺
时间:
2017-4-25 08:49
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木木木木
的帖子
& L- w/ ~& j/ ^5 J1 e+ _6 V
) @) \, q) ~* s0 c& Q1 w
如果是污染被双抗短时抑制了，也会出现这样的视野（短期不爆发，但也不长）。
0 V' k) A/ D2 e* {
作者:
esound11
时间:
2017-4-25 10:29
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esound11
的帖子
3 [4 y" |/ l6 A1 V& Q
$ d+ m2 u4 H/ h) O. z
不是污染，培养液还是澄清的
作者:
esound11
时间:
2017-4-25 10:30
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五口二木
的帖子
2 J1 t; ^ B4 _
2 U( c: p7 B# o& i9 @+ h. ^
养了二十多天吧，变成球意思是分化了吗？
作者:
esound11
时间:
2017-4-25 10:31
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laputa12
的帖子
- ^' X: O& A1 x/ a5 P' V7 g
5 l/ g- p2 Q0 o
这个无血清培养基说明书上写着可以直接由有血清转变为无血清的
作者:
esound11
时间:
2017-4-25 10:33
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baby00000003
的帖子
# k/ g7 V# d0 I' J
5 v0 ]" f. F# p
是在培养瓶底包被一层类似于matrigel的那样的东西吗？fibronectin、PDL、cellbind的瓶子底部已经包被好了？贵吗？不好意思，第一次做，不太懂。
作者:
esound11
时间:
2017-4-25 10:35
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chimo100
的帖子
1 u9 l7 N1 c: T1 G
' V( ~/ p% w, s0 M
我也不太清楚，感觉之前用无血清养的UC-MSC有的还是状态不错的，只不过最近大批的细胞成球，感觉很不对。
作者:
esound11
时间:
2017-4-25 10:36
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理科小文艺
的帖子
- D4 |* p4 N* i( w, p$ t" T
2 a' U7 K y: `' \
不是污染，培养液还是澄清的
作者:
baby00000003
时间:
2017-4-25 10:47
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esound11
的帖子
6 [$ [ T- I$ x0 q4 K. {
& Y3 D! O% j, @5 n, c0 K" ]
cellbind是corning的一个产品系列，拿来直接用，可以增强细胞贴壁。fibronectin和PDL需要自己配包被液，就像你说的matrigel～
作者:
baby00000003
时间:
2017-4-25 10:47
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esound11
的帖子
9 u: q: p' S' X2 f2 `% s
2 u* q+ b4 l+ M- ^! x3 j
cellbind是corning的一个产品系列，拿来直接用，可以增强细胞贴壁。fibronectin和PDL需要自己配包被液，就像你说的matrigel～
作者:
五口二木
时间:
2017-4-25 19:52
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esound11
的帖子
, r6 {& p5 |( P; E
" M/ c2 O! g2 K' L/ i& h
二十几天肯定出现这种情况的了，我养的超过十天不传代的话都开始收缩成球了，养的时间长了些
' Q& h% _/ R) T6 O5 ]7 l
作者:
esound11
时间:
2017-4-26 12:00
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五口二木
的帖子
) Q# t* A- C; f+ K0 ]8 B9 O# ^
: Q( ?) T7 b) v n
这二十几天并不是没有传代啊，有的传代后还好，有的传代后就出现这种成球现象，而且最近传代之后大部分都出现了成球现象。你有什么好方法吗？谢谢啦
作者:
孙帅帅
时间:
2017-4-26 12:05
细胞多少代了，这这号的细胞以前长得可以吗？
作者:
阿秀哥
时间:
2017-4-26 17:21
成骨细胞？？？
作者:
esound11
时间:
2017-4-26 21:01
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孙帅帅
的帖子
# ~* ~" J$ h" }7 e+ {+ f
6 w5 o# M( @5 h6 V7 s
有的是一代，有的是三代，之前大部分可以，小部分成球，最近大部分细胞都成球了
作者:
esound11
时间:
2017-4-26 21:01
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阿秀哥
的帖子
# {& R3 Q1 S$ u( s+ ^9 e
. @2 D9 n% h9 e: v! e; U
间充质干细胞
作者:
阿秀哥
时间:
2017-4-27 09:19
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esound11
的帖子
! U9 p% a+ E8 ], j8 F- m r
& w2 }4 p5 i3 l+ n9 Y/ c) T
我的意思是你那些变的大又圆的细胞有可能是成骨细胞
作者:
esound11
时间:
2017-4-27 14:58
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阿秀哥
的帖子
" C$ m# H# A" r; y h0 x
0 D7 a$ l5 x4 p1 n5 i5 k" O' f
您的意思是脐带间充质干细胞分化为成骨细胞了？
作者:
yangyaping
时间:
2017-6-12 12:01
加血清试试，亲测没加胎牛血清组织块长不出细胞
作者:
pcp1987
时间:
2017-6-29 16:42
以前用lonza的时候，供应商换了产地没说，也出现过成球的现象
作者:
随时准备下线
时间:
2017-7-1 11:17
我一直用的无血清培养基，效果不错。刚开始养的时候，有出现过类似情况，请教一些朋友后，得到的建议：1、更换培养皿 2、注意传代密度不能太低，同时一定得把细胞吹散 3、培养基使用前必须恢复室温，不能拿出来直接就用，之后就没出现过问题。
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