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标题: 脐带间充质干细胞消化，各位用的胰酶浓度及消化时间是多少？ [打印本页]

作者: zuishui 时间: 2017-5-12 13:42 标题: 脐带间充质干细胞消化，各位用的胰酶浓度及消化时间是多少？

各位用的胰酶浓度及消化时间是多少，还有，重要的是75cm^2培养瓶，胰酶用多少体积?

作者: rzghc 时间: 2017-5-12 13:49

本帖最后由 rzghc 于 2017-5-12 13:50 编辑 / g4 G1 O: G+ k$ ~
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0.125%胰酶，T25用1-1.5ml,T75用3-4ml,T175用5-6ml，消化时间镜下看细胞变圆了就可以终止了，差不多1min左右

作者: yj729506 时间: 2017-5-12 14:14

不同的培养基培养的UC-MSCs消化的时间也不同：
比如DMEM-LG+10%FBS培养3天后，用0.25%的胰蛋白酶37℃消化2-3min；. f% C. e4 V4 P) `- m4 Q5 U9 p- f

作者: 剡溪兰客 时间: 2017-5-12 14:49

2 楼说的对，还可以把消化液回到37度，效果更佳好

作者: fenglinzhu 时间: 2017-5-12 15:54

胰酶只要能够覆盖培养皿或者培养瓶的表面就够了，没有强制要求加多少。

作者: 阿秀哥 时间: 2017-5-15 13:37

3ml左右，37℃，消化2-3min

作者: yanxm920 时间: 2017-5-15 15:02

2-3ml 0.125%的胰酶就行，消化时间控制在2分钟内，不能消化太长时间，否则细胞会聚团。

作者: cuijiaoyan 时间: 2017-5-16 09:09

T-75瓶2.5-3mL，我们一般十厘米的皿用2mL消化，刚开始我们用0.25%的胰酶，觉得消化对细胞有所损伤，改用0.125%也可以，后来就一直用0.125%。

作者: 漾轩 时间: 2017-5-17 16:41

0.125%胰酶,3ml/T75,3分钟，EDTA 3-5mll/T75，37度2分钟

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