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标题: 脐带间充质干细胞组织贴壁法培养，一般多长时间就可爬出细胞？ [打印本页]

作者: yj729506 时间: 2017-5-12 14:21 标题: 脐带间充质干细胞组织贴壁法培养，一般多长时间就可爬出细胞？

请问各位，你们培养的脐带间充质干细胞用组织贴壁法，贴壁的组织块一般多大？一般多长时间可以爬出细胞？多久可以第一次换液？什么情况下就可以去除组织块？. t2 Z/ I5 e5 N) Z+ @0 N4 M( |
自己接触UC-MSCs时间不长，一切都在摸索着，想听听大家都是怎么做的，怕自己做错了还蒙在鼓里。5 {7 X1 K8 G' F& H3 V7 P
谢谢大家~

作者: 剡溪兰客 时间: 2017-5-12 14:48

7天到10天出来。组织越小越好，第一次换液时间可以长一点没事，7天。细胞爬出来就可以去掉组织块

作者: fenglinzhu 时间: 2017-5-12 16:01

7-20天，不到20天坚决不要放弃，组织块的话2mm*2mm左右吧，看培养基颜色，不变黄就可以不换液，等细胞爬起来了就把组织块去掉。

作者: baby00000003 时间: 2017-5-12 16:46

fenglinzhu 发表于 2017-5-12 16:01 ! O2 `6 G/ B o5 T# J; _8 f
7-20天，不到20天坚决不要放弃，组织块的话2mm*2mm左右吧，看培养基颜色，不变黄就可以不换液，等细胞爬起来 ...

而且组织一般可以重复用2-3次，每次收获的都可以算作P0

作者: 五口二木 时间: 2017-5-12 22:46

我的5天

作者: qinchuanniu 时间: 2017-5-13 10:04

回复 yj729506 的帖子4 h# ^5 q& c. L F% K
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贴壁法组织块大小文献报道不一，1x1cm、2x2cm都有，关键在于的要取华通氏膜，否则会有大量的内皮细胞，2在初期可用少量培养液，保持组织块湿润即可，待完全贴附后再加入适量培养液，一般5-7天后有细胞从组织块边缘长出。

作者: 金奇橙 时间: 2017-5-15 12:02

3-20天都有可能，一般5-7天

作者: yj729506 时间: 2017-5-15 13:23

谢谢大家的回复，收获很大。
我的组织块已经六天了，培养皿中只有1、2个组织块有爬出细胞，细胞数还是个位数，再等等。

作者: yanxm920 时间: 2017-5-15 15:03

一般7-10天就会有细胞爬出来，在第7天时进行全量换液，仔细观察培养瓶。

作者: cuijiaoyan 时间: 2017-5-16 09:13

3-14天爬出最好吧，时间越长细胞状态会越差，组织块大小2×2是可以的，如果能剪得更小1×1最好了，根据培养基消耗情况进行换液。

作者: yj729506 时间: 2017-5-17 15:04

回复 cuijiaoyan 的帖子4 Q- d; t# f+ Z3 a3 {: v" s

2×2，是2mm×2mm吗？那么小加培养液不会漂起来吗？我用的是5mm×5mm

作者: 519797934 时间: 2017-5-17 15:07

一般7天左右就有细胞爬出，10天就能传代了

作者: 漾轩 时间: 2017-5-17 16:25

组织块小点容易贴壁，细胞出来快慢跟培养基关系很大，LONZA的无血清培养基5天换液，5天左右细胞出来，组织块可以再植培养，都会有细胞出来

作者: cuijiaoyan 时间: 2017-5-17 17:02

回复 yj729506 的帖子4 ^. H) I# Y( Z8 k, m
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你先贴几个小时，贴牢了再加培养基，不会掉的。

作者: yj729506 时间: 2017-5-18 08:25

回复 cuijiaoyan 的帖子& N3 Y% ~& s/ j; ~* v3 h" H7 S

先贴几个小时，组织块不会坏死吧？你们一般是放在哪里让组织块贴壁呢？我是放在37℃，倒置，上次做也就倒置了30-40min，感觉还是有些漂了。主要是我拿到脐带都晚上了，这样都得做到9点多。

作者: rzghc 时间: 2017-5-18 08:29

培养基可以少加点，刚能铺满瓶子就行了，不会飘起来

作者: cuijiaoyan 时间: 2017-5-18 10:52

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2-4个小时组织块不会死的，放心，我们也放在培养箱倒置。

作者: zuishui 时间: 2017-5-23 10:05

我觉得主要取决于细胞贴壁状态吧，贴的不好会很慢，我用培养瓶养的，包被的贴得好，不包被贴不上多少，还是技术不到家啊。不过你用培养皿应该比较好贴吧

作者: Ivan0108 时间: 2017-5-24 12:57

正常情况7-10天肯定有爬出来的，中间最好全量换液一次。

作者: 573639471 时间: 2017-5-24 13:20

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组织块1立方毫米，也有人做到5立方毫米，爬出时间一般为7天，我最快的是5天，也有10天出来的，换液5-7天第一次换液，细胞周围密度70%左右可以去除组织块啊

作者: 木木木木 时间: 2017-5-25 08:53

我这里基本上是7-8天就可以长出2-3个克隆，基本上是3天一换液，不过是半量。16天左右就可以弃组织块了。

作者: 18627000462 时间: 2017-6-2 16:25

7到10天就会有细胞爬出来，我的是7天第一次换液，之后每三天换液一次，一般第二次换液后就可以传代了

作者: 快乐男孩 时间: 2017-6-4 08:32

一般5天就会有细胞爬出，这也是第一次换液时间，但我遇到过13天才爬出的，组织贴壁切记频繁移动。

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