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标题:
请大家帮我看看我的细胞形态正常吗
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作者:
Leo_yihan
时间:
2017-5-19 13:59
标题:
请大家帮我看看我的细胞形态正常吗
这是培养到第五代的BMSCs，全骨髓贴壁法，培养条件是D/F12培养基+10ng/ml b-FGF+10%FBS（Gibco）
0 p' ~5 V; U$ w5 S/ B q! p* g
这个细胞形态有没有问题啊?
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2017-5-19 13:56 上传
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从这一代开始细胞基本就不长了，开始老化了，不知道是否是培养条件有所欠缺还是其他问题，希望大家能给些意见。
图片附件:
P5-20170330常光.jpg
(2017-5-19 13:56, 881.02 KB) / 下载次数 626
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作者:
Leo_yihan
时间:
2017-5-19 14:00
实验室的拍照软件不好用，图片比较模糊，不是污染了。
作者:
淘知路遥
时间:
2017-5-19 14:21
个人感觉细胞接种密度小了
作者:
baby00000003
时间:
2017-5-19 14:51
很好呀～不过最终还是要用流式说话～
作者:
gxbzjznn
时间:
2017-5-19 21:26
看状态觉得还好啊！长得慢长不起来是不是因为接种密度有点低了？你这个是P几代的细胞？多少天？
作者:
剡溪兰客
时间:
2017-5-20 11:20
太稀了，传代几天的照片？
$ l% ]. ?# U! N- q( Y2 _
作者:
iseeyou1210
时间:
2017-5-20 17:32
细胞看起来还可以，不像老化的。
作者:
innatestem
时间:
2017-5-20 18:15
1.很多原代细胞的分离培养时，接种传代的密度很重要。
+ J/ N k2 p# a# z
2.细胞培养过程中用到的血清很关键，建议你多尝试几种血清，对比一下。
/ c8 u5 |, J9 ~+ f) K1 {
3.原代细胞的分离培养最好在五代以内进行实验，五代以上的细胞状态就会差很多。
# P* T. |; k+ _# X: g
希望对你能有所帮助，祝好！
作者:
Leo_yihan
时间:
2017-5-22 10:54
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gxbzjznn
的帖子
' l7 P; \/ L$ Z8 \5 V
3 }3 G2 A" ^" U* l1 w
我看文献上都是说要1:3传代，但是按这个传代我总觉得细胞很难长起来，我这个是P5代，4-5天时候的照片。
作者:
Leo_yihan
时间:
2017-5-22 10:55
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淘知路遥
的帖子
/ k" Y9 c# q" V4 W
5 k" {3 c" n1 U+ j7 \! d
我看文献上都说要1:3传代，不知道你们一般都是按什么比例传代的？
作者:
Leo_yihan
时间:
2017-5-22 10:55
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剡溪兰客
的帖子
3 N& h) ?# `2 i# ]) |, Y- E
7 q: J7 ]' ]0 p9 t3 ~
这个已经是传代后4-5天的照片了，感觉细胞长不起来
作者:
Leo_yihan
时间:
2017-5-22 10:56
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innatestem
的帖子
- d0 O6 z+ d" I. W+ i
2 x- m% w/ ?2 U* S
请问你们一般按照什么密度传代的？
作者:
niliu730323143
时间:
2017-5-23 09:18
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Leo_yihan
的帖子
P: N- s5 p, @" k/ z# p( x
: V: X9 S3 \+ X+ L7 d! X
按比例是很虚的东西，要按细胞密度来接种啊。
作者:
87牛
时间:
2017-5-23 16:17
个人认为，密度较为稀疏
作者:
wangddk
时间:
2017-5-24 11:10
看图片，长得还能接受啊
作者:
我的小宝贝
时间:
2017-5-25 09:27
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Leo_yihan
的帖子
$ w0 Y. a: O- R
, m" y* q( H0 \* j( V
1：3并不是固定不变的，也要看当时细胞的总数量再决定传代比例。你这个细胞的数量是传代4-5天的，那说明传代时候细胞太稀了。我们传代当时的密度差不多就是这样的。3天就长满了。
作者:
13153546906
时间:
2017-7-14 10:06
细胞接种的密度一般按1*104/cm2，骨髓细胞增殖能力有限，一般细胞每60h长一代
作者:
anzhida0823
时间:
2017-8-2 16:23
因子只加的b-FGF么？是不是再加点别的因子会好一点呢？
作者:
卓俊文
时间:
2017-8-22 13:20
原代细胞状态好1:3，中间几代状态好1:4，后边1:3
作者:
免疫与细胞
时间:
2017-8-23 18:12
个人感觉没问题，挺好的啊。是不是代数太多了
作者:
快乐男孩
时间:
2017-11-27 15:42
传代密度过稀
作者:
追风筝的July
时间:
2017-11-28 08:51
看楼主，传代时密度过低。接种要根据细胞密度来定，不能直接根据文献上走
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