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标题: 第一次诱导iPS,想问下这个形态对吗? [打印本页]

作者: linqun    时间: 2017-6-25 22:13     标题: 第一次诱导iPS,想问下这个形态对吗?

[attach]87143[/attach][attach]87142[/attach]2 y: Y/ m9 k1 v7 f6 \

( b3 f; ^  G, }3 D补充内容 (2017-6-25 22:14):
$ R" I4 [8 u% P- V% o( u: P这是病毒感染10d后的图
作者: 基因疗法    时间: 2017-6-26 04:47

太虚了,这个清晰度是不行的
作者: niliu730323143    时间: 2017-6-26 08:29

诱导的是什么细胞?清晰度不够!
作者: wuxiao101325    时间: 2017-6-26 09:48

有点像了
作者: chimo100    时间: 2017-6-26 11:03

可以挑出来,培养几代看看
作者: linqun    时间: 2017-6-26 11:39

回复 chimo100 的帖子; I; \- {5 i& q; ?* x' \3 c3 W! y
% Q2 Y2 z" R3 P/ V' f- _
挑出来就达不到实验目的了,想问下这样可以做AP染色吗?还是要挑出来培养几代才能去做AP染色?
作者: linqun    时间: 2017-6-26 11:48

回复 niliu730323143 的帖子7 S* t  V4 i6 V

  ]0 {$ B1 P$ p' F诱导的MEF细胞,实验室的照相显微镜只能到这个清晰度了
作者: linqun    时间: 2017-6-26 11:49

回复 wuxiao101325 的帖子6 `' g1 e! n, C+ [

( S8 u. a$ b  L) U那我想问一下,可以直接这种状态做AP染色吗?还是一定把单克隆挑出来才能去做AP染色
作者: wuxiao101325    时间: 2017-6-26 14:41

回复 linqun 的帖子: D( \! f( Y- ~! \- V' y  A

6 H, N2 k4 K2 X挑出来多养点细胞再做染色吧,不然种子都没啦
作者: linqun    时间: 2017-6-26 15:29

回复 wuxiao101325 的帖子9 n6 @( Q* m* A
: _9 W$ h1 v) J+ Q
不怕,我做了三组,就怕这种状态下不好染色
作者: wuxiao101325    时间: 2017-6-27 08:50

回复 linqun 的帖子
8 P7 c" X* P2 \4 ?& K* x
- r7 ?: `. v. m7 n9 N那就可以试一下
作者: linqun    时间: 2017-6-27 21:13

回复 wuxiao101325 的帖子
% s: l' L+ O9 [1 ~  T0 w7 o% \0 e% T* J4 T4 o# T+ P
我今天消化细胞的时候发现,不管怎么吹打,那个单克隆总是以团状存在,不会吹成单个小细胞,是不是诱导出问题了?
作者: linqun    时间: 2017-6-27 21:49

回复 wuxiao101325 的帖子9 T) n: Y1 E- h( l% u/ V9 f4 \0 g1 m

2 S( t/ I. B! E还有我能不能加下你微信好友,我是我们实验室第一个做这个实验的,都没师兄师姐可以问,想要请教你一下,我是北京协和医学院基础研究所的。
作者: wuxiao101325    时间: 2017-6-28 09:24

回复 linqun 的帖子
: @: q* y( q6 S# L9 K3 z0 h' J* i8 k, E9 w7 o
另外几组也有这样的克隆吗?在长大吗?如果不能消化散开估计就不好说了
作者: linqun    时间: 2017-6-28 14:44

回复 wuxiao101325 的帖子" B7 e* R  T/ f3 i

; U  x' x2 s* N$ V# \对啊,其他组都有这种情况,我那个里面还有一种形态的细胞,细胞特别小,密密麻麻长在一起,这种会不会是的?
作者: wuxiao101325    时间: 2017-6-28 16:40

ES/iPS都是体积小长得紧密的,如果是的话应该不会消化不散,而且如果是染AP的话直接挑到小孔里养就行,长够再染
作者: linqun    时间: 2017-6-28 18:11

回复 wuxiao101325 的帖子) f3 d7 B: V# s' P- \. m; K1 d

. |4 h3 K& R5 {( f: W1 r5 C8 [: P好的,谢谢,我已经准备重新做一次了
作者: linqun    时间: 2017-7-21 14:18

回复 wuxiao101325 的帖子( o  G/ |0 X" U

6 U1 h1 o# [: f我知道是为什么了,应该是消化时间不够,我只消化了2min左右。你一半消化多久?
作者: linqun    时间: 2017-7-21 14:18

回复 wuxiao101325 的帖子
- L. Z  t. M) M; @& r* M5 V& i% ]
' [! K( ?9 i5 E5 n( @我知道是为什么了,应该是消化时间不够,我只消化了2min左右。你一半消化多久?
作者: wuxiao101325    时间: 2017-7-24 09:37

5、6分钟吧,确实不好消化
作者: wangxiang    时间: 2017-7-24 12:14

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& q1 }! n7 q+ U( ]- i9 `, ]2 ]4 Y6 m0 H8 ?3 v
你可以再等等看,目前还不是很典型。可以直接染AP,不过还是建议挑出来培养到P10之后再做一系列的鉴定。
作者: lchanlon    时间: 2017-7-24 22:22

可以直接染AP的,因为AP是重编程一个比较早期的marker.
作者: lwr002    时间: 2017-8-22 17:49

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4 J# q" Y/ X3 g! g9 s. I8 ]7 P1 {- {8 f7 p' e" _
你这是原代克隆吧?不是来源同一个单克隆的细胞团,染色结果不能相互等同的。染色的目的就是确认它是不是你所要的细胞,你不先扩增多几代,直接把原代用来染色,岂不是白确认了?除非你染色之后没有后续的实验了。
作者: jidjibaofengxue    时间: 2017-9-4 11:35

细胞要好好养,才能好好做实验
作者: lk754673712    时间: 2018-11-26 14:43

楼主 我们是校友 我也在做ipsc




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