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标题: CIK在对数期冻存后复苏的接种浓度要多少 [打印本页]

作者: 免疫与细胞 时间: 2017-8-3 10:00 标题: CIK在对数期冻存后复苏的接种浓度要多少

CIK养了大概一周，按照通用方法冻在液氮里，现在想复苏解冻，接种密度应该是多少？我们之前按照2*10的6次方接种，是不是浓度低了点

作者: xinmengqifeilyb 时间: 2017-8-3 10:54

冻存前一般密度都在4*10^6吧，复苏后因个体差异，有点多有的少，但有4*10^6基本是没问题的

作者: 免疫与细胞 时间: 2017-8-3 11:24

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我们冻存前（PBMC）的接种密度比较低，在1*10^6左右，冻存后的因为冻存损失，因此上调到2，您说的4*10^6是冻存后的接种密度吗

作者: anzhida0823 时间: 2017-8-3 11:36

可以以冻存前1.5-2倍的浓度接种，培养1-2天后再传代，缓冲一下，如果用血浆的话还建议血浆浓度稍微高一点，希望对你有用。

作者: xinmengqifeilyb 时间: 2017-8-3 13:46

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冻存前的密度

作者: 剡溪兰客 时间: 2017-8-3 17:02

现在都在玩免疫冻存啊？个人认为还是d0冻存比较靠谱

作者: 免疫与细胞 时间: 2017-8-3 17:13

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说重点嘛

作者: 剡溪兰客 时间: 2017-8-4 11:30

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重点就是你这样操作，不靠谱

作者: 免疫与细胞 时间: 2017-8-4 13:37

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哈哈，就是实验看看。

作者: yanxm920 时间: 2017-8-7 14:36

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楼主问的是CIK培养一周后冻存的情况吧

作者: yanxm920 时间: 2017-8-7 14:41

楼主，CIK诱导培养1周后，细胞的数量会很大成，如果冻存的话，可能东村数量会很大，一般冻存密度是1-2的七次方，这样你会冻存很多管，冻存的过程会消耗大量的细胞，所以如果暂时不用的话，最好是冻存PBMC，用之前在复苏培养即可！

作者: 免疫与细胞 时间: 2017-8-7 16:27

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是的，谢谢您，我现在就是和你说的一样做的，只不过想咨询一下冻存后大概的接种密度。我是专做NK细胞的，一直都是冻存7天的细胞，之后复苏继续培养。但现在做CIK，不确定冻存后多大接种浓度比较好。/ P7 g( [9 Q0 @$ |7 z g
你说的冻PBMC我没试过，您做过吗？

作者: yanxm920 时间: 2017-8-7 16:35

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冻存PBMC培养CIK是做过的，没有问题的；NK细胞可以诱导培养后冻存，复苏的密度一般在2的6次方就可以了；CIK细胞太多了，不能与NK的一样，没有试过诱导后冻存CIK再培养！！

作者: 免疫与细胞 时间: 2017-8-7 16:49

本帖最后由免疫与细胞于 2017-8-7 17:11 编辑 5 N/ T- q% M& G$ \) I2 j

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那PBMC冻存后，复苏进行CIK培养的接种密度大概要多少呢？

作者: yanxm920 时间: 2017-8-8 09:18

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一般是1-2的6次方就可以了，培养过程中注意观察，补液。

作者: 免疫与细胞 时间: 2017-8-8 10:12

回复 yanxm920 的帖子* L5 f4 S( e1 E% G; f
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恩，谢谢，其实它跟冻存前接种密度差不多，我们冻存前接种密度就是2×10^6

作者: yanxm920 时间: 2017-8-8 11:13

回复免疫与细胞的帖子# N/ q4 T+ B7 [. ~9 S
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是的

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