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标题: DC培养问题 [打印本页]

作者: ltickp 时间: 2017-8-4 09:48 标题: DC培养问题

用国产DC因子套装培养DC，先从外周血中分离获取PBMC，短暂贴壁培养2h后加含因子培养基10ml培养，第三天补加5ml培养基，不进行半量换液，第六天加促成熟因子，第7/8天收细胞，皿底会出现很多贴壁的，用0.05%胰酶都消化不下来，那这些仍然贴壁性很强的细胞是什么细胞

作者: anzhida0823 时间: 2017-8-4 10:35

是不是未成熟的DC和T细胞呢？建议做流式检测一下

作者: dahui 时间: 2017-8-4 11:29

您的国产DC因子套装是哪家的？

作者: paomosheshou 时间: 2017-8-4 14:10

7 8天DC 细胞自己就飘起来了，不用消化呀

作者: 免疫与细胞 时间: 2017-8-4 17:30

本帖最后由免疫与细胞于 2017-8-4 17:33 编辑

外周血来源是正常人的吗？不过你不用担心，这些细胞应该不是你要的。何况只要DC细胞量够就可以。

作者: yanxm920 时间: 2017-8-7 14:24

估计是DC尚未成熟，贴壁是很难吹起来的；如果DC细胞成熟的话，是会飘起来的！

作者: ltickp 时间: 2017-8-9 09:17

回复 dahui 的帖子! I% {% l. |/ e1 H5 k

达优

作者: ltickp 时间: 2017-8-9 09:21

一般只需要促熟一两天，促熟两天后还是下不来，操作流程上建议用胰酶或细胞刮刀处理，但是贴壁贴太紧了，胰酶消化还是会有很多下不来，另外部分贴壁细胞是可以看到那种较典型的树突结构的，大部分没有或者不典型

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