干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 间充干流式 [打印本页]

作者: 花饶然 时间: 2017-9-6 08:52 标题: 间充干流式

请教大侠们，最近两个月做了比较多种类的MSC流式表型检测，细胞都是培养过好几代的了，CD105总是不稳定，最低的时候都低于10%，最高的时候也有99%的，是细胞本身的问题？操作都是一致的。另外追问下，各位有没有发现细胞冻存过后，表面抗原会丢失的，我觉得下降一点是正常的，但是有的从强阳变为弱阳就太奇怪了

作者: baby00000003 时间: 2017-9-6 10:37

经验上传代特别频繁的CD105低。
至于冻存过后，一般没有立刻用来FACS的吧，好歹贴壁个48h再测？
个人经历：延长孵育时间，比例会高一点～

作者: 花饶然 时间: 2017-9-6 16:58

回复 baby00000003 的帖子

感谢赐教！我们冻存过的有复苏后立即做的，也有培养了再做的，都挺低的。您是说的代次高，还是指传代间隔短的，我们一直都是差不多的，细胞增殖情况快慢悬殊到也不大

作者: baby00000003 时间: 2017-9-7 13:12

回复花饶然的帖子
( X! Z6 {$ Z% o$ t# W
表用“您”，伦家会不好意思

偶说的是传代间隔短，比如3天传一次的可能CD105低，5天传一次的可能好点～
不过低说的是不足95%哈，90%还是有的～

作者: 花饶然 时间: 2017-9-7 13:23

回复 baby00000003 的帖子6 f. ~/ b- Z# z+ g' C. g" }

但是我说的低是跌到50%以下了，好奇怪的说，传代间隔我到还真没关注，谢谢交流。。。7 R% |7 `% @6 _: ?
“您”是尊称，不表示年龄哈

作者: wzs1985 时间: 2017-9-11 11:45

你是用什么培养方法？以及用什么冻存试剂？+ u9 C* a+ |" M& t# S+ \$ e1 s

作者: 花饶然 时间: 2017-9-12 08:33

回复 wzs1985 的帖子6 d' e3 T. l: A$ W7 y0 `: a: U

冻存液就是完全培养基和10%DMSO，几年来都这样

作者: Ivan0108 时间: 2017-9-12 08:37

10%，是不是抗体孵育出现过程中有问题？一般都不会出现这样的啊

作者: 花饶然 时间: 2017-9-12 08:40

回复 Ivan0108 的帖子4 q0 f- ]' Y4 z, L9 ]

木有什么问题呢，我流式虽然做的不多，但这几年都会做一些，应该是木有特殊的1 ]+ {0 r1 c4 _& L' a. P# S

作者: wzs1985 时间: 2017-9-12 10:14

回复花饶然的帖子3 X9 e1 j* ^' W+ |& p6 z+ L
; y# i, Y! m! o% v8 Z
有没有考虑过，现在的血清质量下降了？你用90%血清加10%DMSO试一试？

作者: sports123 时间: 2017-9-17 13:45

请问你们是骨髓间充质，还是脂肪间充质呢，大鼠还是小鼠呢？

作者: 花饶然 时间: 2017-9-18 12:56

人的，各种呢，骨髓的都还正常相对，宫内膜，脐带，牙髓等

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)