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标题: 《cell》文献翻译:到达断裂位点时的DNA复制 [打印本页]

作者: bobo 时间: 2009-10-12 12:07 标题: 《cell》文献翻译:到达断裂位点时的DNA复制

John H.J. Petrin
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Cell, 137, 211 – 212, April 17, 2009
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造成DNA复制叉停滞和损伤的DNA链断裂对DNA复制过程是有害的。Doksani等在本期Cell分析了在裂殖酿酒酵母中，双链DNA的单点断裂对DNA复制的影响。+ H+ v' Y7 I& g+ z5 b/ ?9 J* S
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DNA双链断裂通常是DNA复制的副产物，但DNA损伤关卡的明显激活一般不与细胞通过S期的过程同时进行。有关DNA损伤关卡调节的流行观点是假定关卡激酶Mec1/ART的活化及其活化的影响（如复制原点启动的抑制）是由单链DNA促成的。对与DNA复制有关的双链断裂中关卡途径的忽视引发了一些有趣的问题。双链断裂的一条链必须被切除以便形成单链DNA。在S期产生的双链断裂是否不被切除？当复制叉遇到双链断裂时会发生什么？
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Doksani等在本期Cell分析了这些问题。他们使用芽殖酵母HO（同宗转换）内切核酸酶，该酶可在单个DNA位点诱导双链断裂。在该HO内切核酸酶系统中，HO位点与一个有效的早期DNA复制原点ARS305相邻。HO内切核酸酶的瞬时活化与酵母细胞进入S期同时发生，这对细胞通过S期的动力学没有什么影响。在80分钟之后，即细胞已经完成了S期之后，才能观察到Rad53的依赖于Mec-1的磷酸化(Rad53是细胞周期因响应DNA损伤而停止时所必需的关卡激酶)。这并不是由于缺少双链切割，因为Doksani等的实验表明在S期细胞中，双链断裂切除的速度与G2期细胞没有什么本质的不同。DNA双链断裂发生80分钟后才能看到Rad53的活化，这与先前的观察十分吻合：引发关卡响应需要约10 kb的单链DNA，HO内切核酸酶对断裂的切除速度是约4 kb/小时。换句话说，需要有约80分钟才能得到激活Rad53所需要的单链DNA(在两个方向各切除约4 kb产生约10 kb的单链DNA)。
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这是否意味着单个双链断裂没有任何影响？并不完全是这样，但它的影响完全出乎意料。Doksani等人所研究的特定双链断裂对S期的酵母群体的影响没有达到100%，但他们也进行了局部分析。他们不仅用双相凝胶分析了复制原点的启动，也分析了与断裂位点相邻的DNA复制叉的进程。复制体（在复制原点进行DNA复制的蛋白质复合物）在接近断裂位点时并未停止，也没在断裂位点的另一侧重新启动。这意味着一旦复制叉到达断裂点，复制体将从DNA上解离。实际上在每次复制原点启动时，可产生两个向相反方向行进的姐妹复制叉。有可能存在“复制工厂”，使在不同姐妹复制叉上的复制体以偶联的方式工作。这种可能性表明在断裂位点的一个姐妹复制体的解离可影响另一个复制体。但正如Doksani等展示的，实际情况并非如此，因为在305L的姐妹复制叉305R从DNA上解开后，305L复制叉上的复制体在很长时间内仍继续行进。这与最近在大肠杆菌中得到的数据很相似，大肠杆菌的两条姐妹复制叉不以偶联的方式行进。! _5 ?* r9 i+ \" W# Y# B- h& M1 i
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令人惊讶的是，Doksani等人的研究表明，HO内切核酸酶断裂位点的诱导实际上可增加芽殖酵母ARS305复制原点的启动。对靠近天然HO内切核酸酶断裂位点ARS313和ARS314的两个静止复制原点的分析支持上述解释。Doksani等发现双链断裂的诱导可使静止的复制原点活化，这两个复制原点都可启动。这种影响是局部的，因为S期的总速度没有变化，说明在双链断裂诱导后，大多数静止的复制原点保持在活化状态。使复制原点活化的信号是什么尚不清楚，目前还没有可阻止产生这种活化的酵母突变株。由于这种活化的局限性，令人想到它是一种反式作用机制。Doksani等假定断裂诱导的DNA超螺旋的变化以及染色质的改变可能是影响复制原点活化的因素。DNA广泛断裂和解离的产生条件可活化DNA损伤关卡，抑制复制原点的启动，它们可能会超越这种新鉴定的机制。
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Doksani等还发现在断裂位点缺少Sae2和Tel1蛋白以及在缺少Mrel1复合物时，在双链断裂位点可形成十字形DNA结构。这些通过双相凝胶电泳鉴定的结构可能是所谓的“鸡爪”结构，这种结构是由于诱导双链断裂后退的Sgs1解旋酶的作用而产生的。这可能意味着由复制叉和双链断裂引发的变化与羟基脲造成的复制叉停顿引发的变化在某种程度上类似，但有一个重要不同，即关卡缺陷并不是这类结构形成的基础。Doksani等提出了一个Tel1和Mrel1复合物可使复制叉的一条臂水解的模型。这可能会阻止复制叉在断裂位点的后退以及其后产生的十字形结构的切割。总体来说，Doksani等人提供的证据表明在总DNA损伤关卡活化门槛之下的DNA损伤水平可通过异乎寻常的方式影响DNA复制过程。8 c/ Z; p) ?( O/ j* r& w/ c

本文转自建人先生原创，感谢

作者: hualin840518 时间: 2010-12-17 13:16

很好很强大

作者: huadezitai 时间: 2011-3-10 16:13

学习了谢谢

作者: 红旗 时间: 2015-6-24 11:34

观看中

作者: tuanzi 时间: 2015-7-16 18:09

先顶后看

作者: 大小年 时间: 2015-7-22 15:37

干细胞分化技术

作者: 泡泡鱼 时间: 2015-7-24 20:10

希望大家帮我把这个帖发给你身边的人，谢谢！

作者: awen 时间: 2015-8-19 08:09

楼主也是博士后吗

作者: 昕昕 时间: 2015-8-22 00:01

脂肪干细胞

作者: laoli1999 时间: 2015-8-23 08:34

ding 支持

作者: 昕昕 时间: 2015-9-19 12:07

加油站加油

作者: tuanzi 时间: 2015-9-20 10:09

一个有信念者所开发出的力量，大于99个只有兴趣者。

作者: 杏花 时间: 2015-9-29 12:35

嘿...反了反了,,,,

作者: 红旗 时间: 2015-10-2 10:56

观看中

作者: s06806 时间: 2015-10-22 12:01

干细胞研究还要面向临床

作者: 陈晴 时间: 2015-10-23 11:42

也许似乎大概是，然而未必不见得。

作者: 榴榴莲 时间: 2015-10-29 07:10

小心大家盯上你哦

作者: 123456zsz 时间: 2015-11-4 18:43

设置阅读啊

作者: nauticus 时间: 2015-11-17 09:54

我好想升级

作者: 泡泡鱼 时间: 2015-12-3 14:18

支持一下吧

作者: 命运的宠儿 时间: 2015-12-7 20:09

肌源性干细胞

作者: laoli1999 时间: 2016-1-14 10:36

今天临床的资料更新很多呀

作者: 小丑的哭泣 时间: 2016-2-20 14:18

…没我说话的余地…飘走

作者: 桦子 时间: 2016-3-12 19:33

楼上的稍等啦

作者: sshang 时间: 2016-3-21 17:31

照你这么说真的有道理哦呵呵不进沙子馁~~~

作者: 我学故我思 时间: 2016-6-4 18:35

帮你项项吧

作者: awen 时间: 2016-6-16 10:01

嘿嘿......哈哈......呵呵.....哟~呼

作者: dongmei 时间: 2016-6-23 20:43

顶．支持，路过．．．．．

作者: pspvp 时间: 2016-8-19 10:01

青春就像卫生纸。看着挺多的，用着用着就不够了。

作者: 追风 时间: 2016-9-2 13:35

每天到干细胞之家看看成了必做的事情

作者: 旅美学者 时间: 2016-10-16 11:31

朕要休息了..............

作者: 365wy 时间: 2016-10-17 19:26

想都不想，就支持一下

作者: 海小鱼 时间: 2016-10-27 19:18

帮你项项吧

作者: 小敏 时间: 2016-11-5 13:33

围观来了哦

作者: dogcat 时间: 2016-11-12 23:43

我的妈呀，爱死你了

作者: 三星 时间: 2016-11-29 08:10

内皮祖细胞

作者: 修复者 时间: 2016-12-20 02:09

支持你就顶你

作者: 一个平凡人 时间: 2016-12-26 08:01

感謝樓主干细胞之家真的不错

作者: MIYAGI 时间: 2017-1-5 11:01

哎怎么说那~~

作者: wq90 时间: 2017-1-11 07:53

我喜欢这个贴子

作者: IPS干细胞 时间: 2017-1-18 17:54

是楼主原创吗

作者: doc2005 时间: 2017-1-24 00:00

顶顶更健康，越顶吃的越香。

作者: 碧湖冷月 时间: 2017-1-26 05:06

呵呵,明白了

作者: qibaobao 时间: 2017-1-30 10:55

观看中

作者: sshang 时间: 2017-2-10 04:26

不错的东西持续关注

作者: heart10 时间: 2017-2-24 01:43

继续查找干细胞研究资料

作者: MIYAGI 时间: 2017-3-6 19:03

对不起，我走错地方了，呵呵

作者: 锦锦乐道 时间: 2017-4-17 10:43

爷爷都是从孙子走过来的。

作者: tempo 时间: 2017-4-21 21:22

好困啊

作者: kaikai 时间: 2017-5-2 14:27

不错的东西持续关注

作者: tuting 时间: 2017-5-24 00:49

真是有你的！

作者: 墨玉 时间: 2017-5-28 15:50

羊水干细胞

作者: dglove 时间: 2017-6-5 18:54

病毒转染干细胞

作者: 罗马星空 时间: 2017-6-15 06:07

慢慢来，呵呵

作者: 碧湖冷月 时间: 2017-6-17 15:01

不错不错.,..我喜欢

作者: 碧湖冷月 时间: 2017-7-15 10:54

加油站加油

作者: htc728 时间: 2017-7-15 13:52

昨晚多几分钟的准备，今天少几小时的麻烦。

作者: 黄山 时间: 2017-8-31 05:23

干细胞与动物克隆

作者: Diary 时间: 2017-9-6 14:27

貌似我真的很笨????哎

作者: 快乐小郎 时间: 2017-9-26 18:57

不错不错.,..我喜欢

作者: 快乐小郎 时间: 2017-10-1 19:52

世界上那些最容易的事情中，拖延时间最不费力。

作者: biopxl 时间: 2017-10-12 15:53

…没我说话的余地…飘走

作者: cjms 时间: 2017-10-21 15:54

其实回帖算是一种没德德，所以我快成圣人了

作者: myylove 时间: 2017-10-25 17:18

嘿嘿

作者: 咕咚123 时间: 2017-11-9 19:08

今天再看下

作者: bluesuns 时间: 2017-11-14 11:27

佩服佩服啊.

作者: haha3245 时间: 2017-11-21 19:50

只有一条路不能选择——那就是放弃的路；只有一条路不能拒绝——那就是成长的路。

作者: 365wy 时间: 2017-12-7 04:00

呵呵，等着就等着....

作者: myylove 时间: 2018-1-10 22:27

一定要回贴，因为我是文明人哦

作者: MIYAGI 时间: 2018-1-21 20:10

今天再看下

作者: 碧湖冷月 时间: 2018-2-18 23:03

看看..

作者: 一个平凡人 时间: 2018-2-22 16:01

支持你一下下。。

作者: happyboy 时间: 2018-2-28 14:10

初来乍到，请多多关照。。。嘿嘿，回个贴表明我来过。

作者: 咕咚123 时间: 2018-4-7 05:11

感觉好像在哪里看过了，汗~

作者: 坛中酒 时间: 2018-4-19 19:02

你加油吧

作者: 王者之道 时间: 2018-5-9 05:54

想都不想，就支持一下

作者: 咕咚123 时间: 2018-5-19 16:54

知道了不错~~~

作者: 咕咚123 时间: 2018-5-29 00:51

谁能送我几分啊

作者: myylove 时间: 2018-6-20 23:01

做对的事情比把事情做对重要。

作者: DAIMAND 时间: 2018-7-19 09:18

慢慢来，呵呵

作者: 桦子 时间: 2018-8-3 00:10

哈哈，看的人少，回一下

作者: 橙味绿茶 时间: 2018-8-16 01:18

严重支持！

作者: na602 时间: 2018-8-16 14:35

dddddddddddddd

作者: marysyq 时间: 2018-8-19 12:10

要不我崇拜你?行吗?

作者: 罗马星空 时间: 2018-8-27 20:38

淋巴细胞

作者: vsill 时间: 2018-9-10 16:35

楼上的话等于没说~~~

作者: 蝶澈 时间: 2018-9-22 23:10

我喜欢这个贴子

作者: 干细胞2014 时间: 2018-10-12 09:54

我是来收集资料滴...

作者: tuting 时间: 2018-10-17 05:44

先看看怎么样！

作者: 干细胞2014 时间: 2018-10-23 06:06

世界上那些最容易的事情中，拖延时间最不费力。

作者: txxxtyq 时间: 2018-10-29 23:23

牛牛牛牛

作者: 加菲猫 时间: 2018-11-14 22:03

努力,努力,再努力!!!!!!!!!!!

作者: 泡泡鱼 时间: 2018-11-21 20:58

我来了~~~~~~~~~ 闪人~~~~~~~~~~~~~~~~

作者: 温暖暖 时间: 2018-11-25 08:18

不错不错比我强多了

作者: 龙水生 时间: 2018-11-27 22:17

有才的不在少数啊

作者: ines 时间: 2018-12-7 11:18

希望可以用些时间了~````

作者: 桦子 时间: 2018-12-15 22:50

好人一个

作者: awen 时间: 2018-12-24 12:10

小生对楼主之仰慕如滔滔江水连绵不绝,海枯石烂,天崩地裂,永不变心.

作者: Greatjob 时间: 2018-12-31 21:19

帮顶

作者: cjms 时间: 2019-1-2 03:08

嘿嘿......哈哈......呵呵.....哟~呼

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