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标题: 细胞传代培养的隔代污染 [打印本页]

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作者: wmch666    时间: 2017-9-26 17:13     标题: 细胞传代培养的隔代污染

各位大神，能不能问一下细胞培养有没有可能原代污染但是直到传到第三四代的时候才爆发？是不是在细胞传代的前10个小时细菌最容易大量繁殖？
! d9 Q. K1 K! w4 k' }+ r4 g3 y' ops：平时细胞培养是不加双抗的。

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作者: fenglinzhu    时间: 2017-9-26 17:16

有些细菌是传代后爆发，我也遇到过这样的情况

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作者: baby00000003    时间: 2017-9-27 08:10

有的菌确实长得慢，10天左右才爆发出来，早了确实用显微镜不容易看得到。& B$ R  F: v* p+ e. Q
嗯，我这个案例最后鉴定是兼性厌氧的杆状菌，没有更细节的鉴定了

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作者: cxs    时间: 2017-9-27 08:38

回复 baby00000003 的帖子
- X6 g& h8 S: x+ c$ C. y# `! _7 x) j" G4 E$ U# z: g, r" P4 w3 C0 a" D
谢谢朋友分享案例，一般碰到这种污染的情况，常规想法肯定会最先考虑是不是最近的操作引入的污染。对于这种潜伏期这么长的污染，特别好奇，如果能确认确实存在10天左右才爆发的菌，那是一个很好的经验分享。不过有个问题，那10天之内没发现的时候是怎么确认它存在的？

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作者: wmch666    时间: 2017-9-27 09:13

回复 fenglinzhu 的帖子
: F& {( _; j  c" w9 ^; g6 z" m# \0 n
0 l5 e( z6 w0 w5 H1 H" p% x对啊，我培养的细胞就遇到了，但我们的实验室都是洁净度非常高的，4个不同的人独立操作，试剂现配的，怀疑是元代就污染了

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作者: wmch666    时间: 2017-9-27 09:18

回复 baby00000003 的帖子- W+ }1 u6 `0 l7 o
. a* H4 ^( B; z0 D8 v
多谢，还想问一下您如果细胞传代后的一段时间里是否会因为竞争抑制的消失而使细菌爆发，我查的资料上说细胞不会与细菌存在竞争，但是有的人说长势良好的细胞是会抑制细菌繁殖的，请大神指教

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作者: fenglinzhu    时间: 2017-9-27 09:22

回复 wmch666 的帖子/ X. g( ~+ w; S5 u) G8 o7 {. F: D
3 l3 Y; T" `) E! [# l  K
我碰到过的，很难处理掉，各种消毒后还是会不定期的爆发，当时我是换了血清后爆发的，怀疑的血清不合格，但是也没有直接的证据，不知道你用的是什么血清。

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作者: wmch666    时间: 2017-9-27 10:21

回复 fenglinzhu 的帖子
4 S, n2 g+ L& W; c- J, v
5 Y7 G- a+ C& c1 u* ^6 o我们都是用的无血清商品培养基，以前一直很好，感觉不是培养基问题，用的同一瓶培养基有些是没问题的，有些种类的细胞就污染了，应该是组织没处理好。

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作者: baby00000003    时间: 2017-9-27 11:27

回复 cxs 的帖子
( e# @) ]: a# ]3 M1 m+ G) P9 c+ e+ W; l
0 ^' P! G0 l. @* ~2 T8 z6 m不知道它的存在呀～就是D10才看见的，然后做了血培养～

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作者: baby00000003    时间: 2017-9-27 11:30

回复 wmch666 的帖子
6 r5 P4 E/ O1 V' \! @7 w* {
! P. [, v: r' D- _- D5 g矮油～能抑制细菌的细胞....要么是某些个会吞噬的免疫细胞，要么是培养环境特殊吧（纯属胡猜）～+ Z) z' x8 b* f
代谢比较缓慢的菌释放毒素和消耗营养都比较慢，也许确实不会太影响细胞生长

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作者: fenglinzhu    时间: 2017-9-27 16:05

回复 baby00000003 的帖子& S8 b% X4 [) q0 q4 k

+ T6 k8 u. [- C: ~3 A: d/ M. w其实还是存在一定的竞争关系的，尤其是在加了双抗的培养基培养的情况下，我查过一些资料，上面说当细胞长势良好的情况下，有些细菌不会大规模的爆发起来，难以发现污染。在传代后尤其是多次传代后，细胞的状态相对会差一点，此时细菌就开始大规模繁殖，到这个时候才会发现污染。

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作者: baby00000003    时间: 2017-9-27 16:20

回复 fenglinzhu 的帖子2 B' m4 Z+ T5 |- D5 ~7 l# F* Z
& I- B/ S9 M- E. s" t$ B
说的大约是支原体～不过冒出来支原体可能实验室都要废了

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作者: cxs    时间: 2017-9-27 16:26

回复 baby00000003 的帖子
$ T' I. V. C* D0 R
) s7 x5 O9 {+ L  m) n你好，你可能误解我的意思了，我是指如果是D10才发现的污染，那按照常理来推断，不是应该先考虑是否D9或者稍微再早一点的操作引入的污染吗？是如何判断D1就存在该污染源的？

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作者: baby00000003    时间: 2017-9-27 16:29

回复 cxs 的帖子
7 |+ t8 i" g  {2 W3 l" k$ B' F+ E
; k6 H4 _+ R( P, k9 R从D0开始就没有任何操作了，一直在箱子里闷着，只是偶尔拿出来看看，没有开瓶盖的操作

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作者: cxs    时间: 2017-9-27 16:31

回复 baby00000003 的帖子
1 T- p% V2 ?6 H8 j
! Y: a+ h7 y0 k( p2 b哦哦，是这么回事啊，原代取材确实容易有很多杂七杂八，说不清道不明的东西，长见识了，多谢，有劳！

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作者: fenglinzhu    时间: 2017-9-27 16:32

回复 baby00000003 的帖子8 f) |' \0 g# v

/ Y! @# X0 |- k+ ]) p& b! E不是支原体，是部分细菌，并不多见

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作者: 会飞的鱼    时间: 2017-9-29 10:02

很有可能原袋就被污染了，可能数目较少，不过试剂，器材要严格操控

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作者: wmch666    时间: 2017-9-30 10:30

回复 会飞的鱼 的帖子
$ D+ O0 e& U( F% I; \( ]: |! D* M9 h; U6 @. U  W! ^4 F8 {8 y
谢谢，以后会注意的

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作者: wmch666    时间: 2017-9-30 10:39

回复 fenglinzhu 的帖子( y) _8 I. V4 B1 B+ A  U# f

8 S; J$ J  z2 X* j嗯，你的分析印证了我的想法，以后在这方面会多注意，多洗几遍。。。

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