干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 跪求脐带间充质干细胞的鉴定方法-免疫荧光技术 [打印本页]

作者: SKC-SFC 时间: 2017-10-24 10:46 标题: 跪求脐带间充质干细胞的鉴定方法-免疫荧光技术

最近在做染色体异常核型的脐带间充质干细胞的课题，需要做免疫荧光检测方法。看了国内外的一些。都写得相对简单。寻求详细的操作方法。万分感谢！

作者: SKC-SFC 时间: 2017-10-24 10:48

急用

作者: 缥飘实验员 时间: 2017-10-24 16:04

这个细胞各大文献几乎没有人染，UC-MSC 有特异性的 marker 么，可以染 CD 分子啊

作者: SKC-SFC 时间: 2017-10-25 10:09

回复缥飘实验员的帖子' w0 W# W ^8 v3 ^" J
/ U p2 k; {6 n1 U2 J
我检测的是CD105，CD73，CD34，CD45 就是缺少详细的操作方法，包括一抗和二抗的选择。

作者: SKC-SFC 时间: 2017-10-27 10:51

哎，帖子就这么沉了啊

作者: baby00000003 时间: 2017-11-1 15:30

要做核型分析吧？找第三方出报告～

作者: SKC-SFC 时间: 2017-11-2 10:49

回复 baby00000003 的帖子; V1 T8 x! w" A+ x/ |4 i

不是做核型分析是做间充质干细胞的表型检测，用免疫荧光的方法检测

作者: baby00000003 时间: 2017-11-2 14:34

回复 SKC-SFC 的帖子( }$ h* A8 t- [0 U/ }' P1 [" R
" U" D% w3 S( {7 k1 \; Q
做表型的话，流式多好～操作比IF简单，而且更有统计学意义

作者: bin 时间: 2017-11-6 10:50

脐带间充质干细胞一般不做免疫荧光染色，一般做流式检测。阳性CD分子有CD90，CD105，CD73.阴性CD分子有CD45，CD31等。不过你要做免疫荧光染色也可以的，一抗选小鼠或者兔抗你要的CD分子的抗体，二抗选择荧光素（一般是红色和绿色荧光）标记的羊抗鼠和羊抗兔的抗体。具体操作应该有很多方法的，这是非常常用的技术，你们实验室肯定有人会。关键是抗体不要相互干扰。另外再用Hochest（蓝色荧光）染细胞核，这样三标的照片很漂亮的。

作者: SKC-SFC 时间: 2017-11-14 13:19

回复 bin 的帖子$ S6 m) j, C9 W( g7 K

谢谢您。我们流式做CD105,CD73，CD90，HLA-DR,CD34，CD45，CD44，CD29，CD11b,CD19.免疫荧光更多的是做膜内表达的CD分子。或者分化成神经干细胞等细胞的一个鉴定方面。

作者: SKC-SFC 时间: 2017-11-14 13:19

回复 baby00000003 的帖子
$ {) m+ s" R7 {- V9 _6 R0 I
同意您的说法

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)