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标题: 干细胞培养与消化 [打印本页]

作者: zxb1105453899 时间: 2017-11-30 08:42 标题: 干细胞培养与消化

之前用完全培养基培养脐带间充质干细胞后，用胰酶进行消化过后发现细胞会粘成一团，吹打不散，是什么原因？

作者: 2357710447 时间: 2017-11-30 09:19

1.首先细胞培养培养时间过长，细胞呈现层状覆盖，消化的时候如果控制不好时间，等待细胞完全变圆脱落，那么细胞就是结团成絮状，不易吹散；
2.其次消化的时候时间不要太长，用手轻拍瓶壁，使细胞逐层脱落，不要这样不至于结团难以吹散，即使有絮状，用移液枪也能吹散；
3.再次次一点就是倒出培养上清时，用生理盐水冲洗两遍，细胞分泌的物质黏连在表面，消化的时候细胞结团黏连不易吹散；! D3 Y9 h8 [- p4 E. a6 N
4.最后就是用移液枪吹离心管底部的细胞时，液体体积不超过5ml，这样吹力较大，容易吹散，待吹散后再加入自己需要量体积的液体混匀即可。
希望对你有用！

作者: zxb1105453899 时间: 2017-11-30 16:14

回复 2357710447 的帖子

非常感谢你的解答

作者: cxs 时间: 2017-11-30 16:17

回复 2357710447 的帖子 E$ S8 M! Y% ]' X
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这位朋友，请问为何“等到细胞完全变圆脱落”反而会结团呢？有点不太理解

作者: 2357710447 时间: 2017-12-1 09:24

回复 cxs 的帖子
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1.细胞并不是一个一个脱落，一片一片的
2.密度过大，细胞相互之间也有一定的吸附作用
3.如果在细胞层叠时，不用盐水冲洗表面的分泌物，粘稠度很高，结团率极高

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