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标题: 请问我拿到国外同行给邮寄的载体质粒后如何操作 [打印本页]

作者: jianlindunev 时间: 2009-12-3 13:10 标题: 请问我拿到国外同行给邮寄的载体质粒后如何操作

请问我拿到国外同行给邮寄的载体质粒后，我该如何把它取下来呢？如何操作，我做什么准备/谢谢！以前没有做过

作者: 饶冠华 时间: 2009-12-3 15:47

直接把含有质粒的圈圈剪下来然后用无菌水溶解吸一部分水溶液直接转化到菌中大提质粒测序

作者: kmana 时间: 2010-3-6 21:32

我们这边用喜欢用TE缓冲液溶解

作者: llingzu 时间: 2010-3-9 14:02

我们也用TE缓冲液

作者: janeyu 时间: 2010-3-25 13:21

或者把圈圈用刀刮下来，溶解在水或TE中，做个转化，先做个小提检测就可以了，如果有需要再做大提。

作者: rainsky1314 时间: 2010-4-7 17:03

仅对沙发做个补充：若是同时有好几个质粒，用剪刀剪时注意避免交叉污染，可将已剪过质粒的剪刀用酒精泡一下，再用火稍烧即可。

作者: rainsky1314 时间: 2010-4-7 17:04

仅对沙发做个补充：若是同时有好几个质粒，用剪刀剪时注意避免交叉污染，可将已剪过质粒的剪刀用酒精泡一下，再用火稍烧即可。

作者: ppcl2 时间: 2010-4-8 06:36

把画圈部分用剪刀剪下来，溶解在高纯水或TE中，做转化提取鉴定就可以了。

作者: tspaulzhao 时间: 2010-4-8 16:47

不要全剪下来,先剪四分之一做,如果失败,有着再一次的机会。

作者: wuxiao101325 时间: 2010-9-29 14:57

回复 1# jianlindunev
请问你们实验室可以收到国外直接寄过来的载体质粒么？不需要经过海关吗？ ]3 @* T Z: K9 \- ?! c2 s
我想买addgene的载体质粒，现在还不知该如何着手，急~

作者: 懵懂干细胞 时间: 2010-9-29 18:29

建议先不要完全剪下来！留一点备用！剪下来的用TE溶解！

作者: shewawa 时间: 2010-9-29 23:34

回复 10# wuxiao101325 , {2 ~8 g# z, S% I
5 `6 g% S) o. G' O, t0 r8 x

你要是看到了你就知道了，那个ＤＮＡ就是保存在滤纸上面，干燥了之后什么都看不出来，用信就能邮．不过ａｄｄｇｅｎｅ怎么邮就不太清楚了，估计是保存条件更好的吧。

作者: wuxiao101325 时间: 2010-9-30 08:53

回复 12# shewawa
谢谢

作者: 大笨鸟 时间: 2010-10-17 15:32

用剪刀将圈圈直接剪下，用镊子将其卷成圆柱形放进离心管中，加入无菌纯水后，4度过夜。如果有分光光度计的话，可以在第二天先吸取1-2微升测下浓度，同时可以跑个电泳鉴定下质粒信息是否与提供者提供的一致。如还不放心，可以直接送出去测序或者是根据浓度计算做转化所需的最佳质粒溶液体积，经过转化后送菌液或是提取质粒后送质粒测序。如果送质粒测序，一定要送无菌纯水洗脱的质粒。希望对你有帮助。

作者: shiqingxi 时间: 2010-10-19 09:00

ding

作者: djj01 时间: 2010-10-19 19:41

剪取相应圈圈部位部分或全部视情况，再用超纯净水中或TE中溶解分离转化，提取做鉴定！

作者: dilal 时间: 2010-12-10 23:27

回复 jianlindunev 的帖子

你是通过给国外同行发邮件获取的吗？国外同意邮寄后需要办理啥手续不？

作者: weiyepan 时间: 2010-12-11 08:03

回复 wuxiao101325 的帖子

我们这边经常寄，如果是寄纸片和EP管，报关的时候就报塑料管和纸片就行了。% l. N1 T7 \; e* ?- s- v9 `! H& r/ j
如果是要质粒溶液，报关就要报核酸，不然手续很麻烦，三天两头就要你解释。。。

作者: lianshan87 时间: 2010-12-13 10:53

我收到过是干粉状的，要先4度离心一下然后用缓冲液稀释就好啦，TE，甚至无菌水都可以，用之前先提个质粒看一下吧

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