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标题: ips诱导因子问题？ [打印本页]

作者: ahfjwangrui 时间: 2010-1-28 09:51 标题: ips诱导因子问题？

急求：各位专家，请帮帮小弟忙，我想获取产生ips细胞的转录因子基因，但是设计的引物不知道是应该针对mRNA反转的cDNA，还是针对cDNA中的一段即，CDS段，" G/ ^$ F7 T# A U0 p- U
我听人说CDS就可以编码蛋白了，做过这方面的专家们，你们是怎么做的？万分谢谢！

作者: ghfvcat 时间: 2010-1-28 10:17

你要做什么用？一般都是CDS 吧，其它辅助序列表达载体上都有的

作者: baichunyu 时间: 2010-1-28 10:22

你设计引物应该这对cDNA，但是你要确定你所扩的序列准确序列，也就是你要确定出这段基因的目的片段，准确的功能区域

作者: ruanyao57 时间: 2010-1-28 10:36

CDS即可，不要poly（A）。

作者: ahfjwangrui 时间: 2010-1-28 11:03

有做过的人吗？你们出来说个话吧，谢谢

作者: ghfvcat 时间: 2010-1-28 11:31

回复 5# ahfjwangrui , J5 L4 [# \) s2 }: a
1 R# T9 b7 }1 z

问题是你要做什么用？构建重组病毒，还是做蛋白表达？载体是什么样的，载体上带着什么？

作者: ahfjwangrui 时间: 2010-1-28 13:00

是做蛋白表达的，我的目的要在细胞内表达四种转录因子蛋白

作者: ghfvcat 时间: 2010-1-28 14:18

回复 7# ahfjwangrui ! y5 Z- B% ~: g+ r% L
1 N& `2 A$ o& A* ?

是在真核细胞里面么？用的什么载体啊，cDNA包含编码区，先导序列以及后续序列等，一般的这些表达常用的序列在载体上都是有的，只要把CDS插进去就可以表达了
一点浅见，如有不周之处，还望指正

作者: qizhi502 时间: 2010-1-28 14:29

addgene 上有各种因子质粒

作者: ghfvcat 时间: 2010-1-28 15:00

回复 9# qizhi502 " r% s! O9 M! S

* v3 Q; ]# A* V% P- R- Y
版主，你买过么？能不能指教一下购买流程？关键是那个进口许可怎么申请？

作者: sunyucheng 时间: 2010-1-29 21:24

回复楼上！这个公司代理！或找上海易宝生物，Google一下就能找到该公司的联系方式，我已经联系了,tamen hu[attach]4021[/attach][attach]4022[/attach]

作者: sunyucheng 时间: 2010-1-29 21:27

回复 10# ghfvcat [attach]4023[/attach]

作者: liangyinxie 时间: 2010-1-30 09:30

购买吧

作者: qizhi502 时间: 2010-1-30 12:30

回复 10# ghfvcat
买这个需要进出口证明好像，不过我没买过。最好还是向合作实验室要

作者: ahfjwangrui 时间: 2010-1-31 23:53

不好意思，我没买过，正在向一个公司申请代理，不知道能否下来

作者: ghfvcat 时间: 2010-2-1 09:53

回复 11# sunyucheng

, B2 S9 K$ x" g0 m
易宝不行，基本上不卖了

作者: zlightmiss 时间: 2010-2-1 14:27

回复 11# sunyucheng

2 d7 y# O) O/ E- m7 ]1 `
好人啊。

作者: zlightmiss 时间: 2010-2-1 14:45

回复 8# ghfvcat
! `- j$ C m/ m! h

受教了，谢谢！

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