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标题: 请问大家做ips的慢病毒怎么浓缩的 [打印本页]

作者: lpzhdm 时间: 2010-1-29 22:23 标题: 请问大家做ips的慢病毒怎么浓缩的

如题谢谢

作者: decloud2009 时间: 2010-1-30 01:48

我们自己用的。一次离心法。。但是以后也都没有弄了，直接用其实也可以。。。
3 g% C7 Q7 X5 ~' \1 _9 p/ s$ ~- y
然后有一个公司有用柱子浓缩病毒的方法。不过好贵啊。。。

作者: liangyinxie 时间: 2010-1-30 09:27

可以超速离心或者直接用超滤管也可以

作者: liangyinxie 时间: 2010-1-30 09:36

对于一般容易细胞可以直接用病毒上清。5 X, O' Z5 r: d
对于较困难的细胞浓缩是必要的，我用的是超滤管浓缩的慢病毒，效果还可以。* R: \) V/ S6 [; N4 x3 x& ?
还有一种方法是PEG8000沉淀法

作者: lpzhdm 时间: 2010-1-30 14:50

谢谢大家的回答，再问两问题，呵呵* M [& \, c$ R" s. R
1. 超速离心的话都用什么样的离心管，或者哪个公司能买到，离心条件/ f, Z/ {9 S; l* X# N$ ?# A
2. 超滤管浓缩的话，一般哪个公司的比较好，能否具体给一下超滤管的型号 B4 F/ C" R! M, A- S! A) @. ~7 C

再次感谢大家

作者: lpzhdm 时间: 2010-1-30 14:52

回复 2# decloud2009
直接用的话滴度大概要多少可以直接用

作者: decloud2009 时间: 2010-1-30 16:17

说起来蛮搞笑的。因为目前条件还没有齐全，我们都是凭感觉的，测滴度也是很麻烦的。3 V# ~- G: Y1 X9 U
& |# S7 o! W' V- b! V! v6 m
自己记得用一个梯度，然后做个对照就心中有数。。

作者: iyaofying888 时间: 2010-2-4 21:29

学习了

作者: hansey 时间: 2010-3-5 20:45

超速离心，80,000g，4℃，90min Q- w9 P2 M1 V2 l
也可以超滤

作者: lpzhdm 时间: 2010-3-7 14:09

能告诉我超离管子的型号和牌子吗，谢谢！回复 9# hansey

作者: hansey 时间: 2010-3-7 19:40

回复 10# lpzhdm

BECKMAN的超速离心管，具体什么型号的忘了，规格大约是13ml的

作者: 小刀 时间: 2010-3-17 15:11

我们不浓缩，所以每次诱导时候总是加很多的量

作者: 大刀无敌 时间: 2010-5-8 21:58

直接用病毒原液浓度 10的六次方到 7次方浓缩液 50000g 2小时管子超速离心机自带不用买

作者: pujixing 时间: 2010-5-8 22:24

我使用的是Beckman公司的40ml离心管，27000转，4度离心2小时。我使用较多的是平转，这样的优点是病毒沉淀都在管子的最底部。当然用角转的话，转速可以提高，但是缺点是病毒沉淀可能会附着到管壁上。浓缩后，使用适量MEM（无血清）溶解。最好滴定一下滴度。

作者: 双刀 时间: 2010-5-12 14:28

超速离心

作者: sidalin301 时间: 2011-10-1 20:38

回复 liangyinxie 的帖子! `/ p9 ^9 B8 M+ L7 A1 C
0 c7 J2 B7 O0 v! a+ k+ t$ w
请问PEG8000沉淀法的具体操作步骤是怎么样的？试剂怎么配？

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