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标题: IPS细胞的获取方面的问题？ [打印本页]

作者: ahfjwangrui 时间: 2010-3-1 10:40 标题: IPS细胞的获取方面的问题？

现在我开始准备着手做这方面的课题，但遇到以下问题：1.在做诱导人的体细胞向IPS细胞转化时，为何要用到MEF细胞，这好像是鼠源性的啊6 H" {- P ^& Y. ~" o% S
2.在做四种逆转录病毒因子转染时，一定要有用逆转录病毒转染培养基吗？这种逆转录病毒培养基可以买到吗？
最后，想认识一位正在做向ips细胞诱导转化的朋友，我的QQ号是158040891！

作者: hansey 时间: 2010-3-4 00:10

简单的说：1.因为MEFs可以分泌一些维持hESCs生长所必须的因子
2.不是很清楚你说的逆转录病毒转染培养基是什么意思，是病毒毒液还是培养基呢？

作者: ahfjwangrui 时间: 2010-3-4 12:57

那个MEFC是不是要经过什么特殊处理呢？

作者: hansey 时间: 2010-3-4 19:36

回复 3# ahfjwangrui ' O% W# |2 L! @
# q: @% P* a* F% n4 V k: s! r" d
得用放射性元素照射后让其停止生长后才能用的

作者: hansey 时间: 2010-3-4 20:24

回复 3# ahfjwangrui

或者是用丝裂霉素处理，总之是使其不再增殖

作者: ahfjwangrui 时间: 2010-3-5 14:32

兄弟，能否发一个相关的protocol给我看看！谢谢

作者: 上海过客 时间: 2010-3-5 15:53

搜索啊，饲养层制备。一大堆的资料。本论坛也很多。

作者: hansey 时间: 2010-3-5 20:34

回复 6# ahfjwangrui
8 t. ^+ {: d) h
这个你很容易就会搜到的啊，制备滋养层细胞是做干细胞最基本的东西

作者: ghfvcat 时间: 2010-3-7 00:08

逆转录病毒转染培养基，我没理解错的话，你说的就是把逆转录病毒添加到IPS的常规培养基里所形成的。
至于饲养细胞，你有人源的当然更好，问题是你有么？总不能去弄人胚吧，鼠源的也能用了，一些生长因子差不多。. [) A7 \/ {8 T# d
我也准备弄这个呢，多多交流～

作者: ghfvcat 时间: 2010-3-7 00:08

逆转录病毒转染培养基，我没理解错的话，你说的就是把逆转录病毒添加到IPS的常规培养基里所形成的。: l0 x+ p! a0 d, Y# X* c( n
至于饲养细胞，你有人源的当然更好，问题是你有么？总不能去弄人胚吧，鼠源的也能用了，一些生长因子差不多。" n* D% `% {% |* S! W. Z; ^1 }! d. t
我也准备弄这个呢，多多交流～

作者: ghfvcat 时间: 2010-3-7 00:08

逆转录病毒转染培养基，我没理解错的话，你说的就是把逆转录病毒添加到IPS的常规培养基里所形成的。( K2 v4 v& b P. ?
至于饲养细胞，你有人源的当然更好，问题是你有么？总不能去弄人胚吧，鼠源的也能用了，一些生长因子差不多。2 U) `9 B, ~, B( P# O
我也准备弄这个呢，多多交流～

作者: hansey 时间: 2010-3-7 13:00

回复 10# ghfvcat

现在已经有人源的feeder了，而且也有商品化的了，但是不是从胚胎取的

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