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标题: PGC的培养 补充中 [打印本页]
作者: ellapan    时间: 2010-3-8 17:47     标题: PGC的培养 补充中

欢迎加入讨论,如果你做PGC的培养,请注意她的时间段,小鼠是胚胎期E13.5以前称PGC,人胚胎期E5-9week称PGC,此后停留在G1/G0的Mitosis arrest期,直到出生后才开始恢复有丝分裂1 K3 n6 H' u! i" L1 _8 X. P
; o$ i3 ^% f; k) t* g. h* d% D$ O& }
如果你刚接触,我推荐你看看下面的文章) m0 z& D9 c5 q( r4 M8 B
1992 long-term proliferation of mouse primordial germ cells in culture
7 t" ]3 v4 m2 U1993 Proliferation of Mouse Primordial Germ Cells in Vitro A Key Role for cAMP/ U( L: S( o# ~
1994 Role of leukemia inhibitory factor and its receptor in mouse primordial germ cell growth. R6 X, }, f, V% I- u/ m+ ]
1995 Purification of Mouse Primordial Germ Cells by MiniMACS Magnetic Separation System
) d6 d: h# h+ q% b1995 Retinoic Acid Is a Potent Growth Activator of Mouse Primordial Germ Cells in Vitro
+ e& k* U. Q2 K+ G" y  o) W" M) F2 Z1996 Autonomous Regulation of Proliferation and Growth Arrest in Mouse Primordial Germ Cells Studied by Mixed and Clonal Cultures8 w- t. I# ~3 y2 m4 x
1998 In vitro adhesiveness of mouse primordial germ cells to cellular and extracellular matrix component substrata+ k, [* H& x4 m
1998 Role of Fibroblast Growth Factors and Their Receptors in Mouse Primordial Germ Cell Growth  t, ]8 k0 i% y7 M: b
2000 A Role for E-cadherin in Mouse Primordial Germ Cell Development
$ ]% T4 M" g; [1 f& M( ^' n' H2000 Regulation of primordial germ cell development in the mouse# k+ u2 v3 P: z# H1 Y
2001 The allocation and differentiation of mouse primordial germ cells
% \% Z2 \. ?! l" W2001 Twenty years of research on primordial germ cells
  U0 I+ P6 f4 P3 Q. Q, U6 p2003 Developmental fate of embryonic germ cells (EGCs), in vivo and in vitro
% {- ^% K9 w' }2003 Primordial germ cells in the mouse
. V+ h( u- O0 u) s$ U( i' |' B4 F2003 Purification of mouse primordial germ cells by Nycodenz: h4 c- r. ^* n) y
2004 Autocrine and Paracrine Mechanisms Regulating Primordial Germ Cell Proliferation
9 n" t& m* F! O* H' M- S& W2004 BMP signaling mediated by ALK2 in the visceral endoderm is necessary for the generation of primordial germ cells in the mouse embryo
4 x$ _3 ^" j& u8 f% Y4 X- U2004 Experimental approaches to the study of primordial germ cell lineage and proliferation
/ O' E- |9 z  U/ U# {2004 Oct4 is required for primordial germ cell survival
$ S7 D+ _  ~1 m6 b) }) d8 [2004 Regulatory role of BMP2 and BMP7 in spermatogonia and Sertoli cell proliferation in the immature mouse.! X1 z5 s* l) `, j7 }5 h
2005 Growth factors sustain primordial germ cell survival, proliferation and entering into meiosis in the absence of somatic cells8 M( R$ V0 C% {; F
0 u7 k) g$ [; m* w. R) [! Z5 q1 d/ q
上面全部是小鼠的PGC分离,培养,鉴定和信号调节的文章,不全,但比较有用.你可以挑你感兴趣的看
作者: jiejesse    时间: 2010-4-6 22:45

很好
作者: ppcl2    时间: 2010-4-7 05:40

本帖最后由 ppcl2 于 2010-4-7 05:43 编辑
7 }4 @) M) k: O: `. @- X3 h; b, _& D8 f' O% j1 |
国内现在谁做老鼠或人的PGC比较牛？谢谢！' e2 \: L' u8 I9 c
现在光养一养，已经不行了吧，分子调控，表观调控才是王道。
作者: ellapan    时间: 2010-4-7 18:20

回复 3# ppcl2
- `( ^5 _- @2 J  |- e" d
6 x8 d" p/ [2 u( l& x* k: w   呵呵 我就是做小鼠PGC的，过去的一年一直做表观遗传之类的，现在实验基本开始收尾，目前开始作ES向PGC分化方面的 具体思路还没形成 希望你多多指导
( p6 j% m; \& h4 h# \  i* Z& D  补充一下 目前国内作PGC比较牛的人有动物所的几个大牛 像孙青原等人，还有科大的史清华和孙斐等人 国内的还有沈伟等人- m- a+ S+ H* a( I1 i: O8 a
你说的表观遗传其实我个人觉得其实单独来说没有那么王道 我想听听你的看法
作者: ppcl2    时间: 2010-4-8 01:17

本帖最后由 ppcl2 于 2010-4-8 01:20 编辑
' K# N) ~1 m  q* U( U/ I0 S0 J9 }1 q4 T) H: L5 }; P
哈哈，你说的这些人一个也没听说过，当然不是说他们不牛，俺不做PGC已经n年了，现在只是偶尔看一下，关注一下进展，但对目前的状况并没有一个整体的把握。
2 u& l* r) v+ ^5 b% n我说表观遗传重要，但并不是说他最重要，因为现在并没有证据证明这些表观遗传的变化是原因还是结果，但频繁的变化肯定是有其重要作用，这是已知的事实。( g; n/ V# T( L" ~# |0 }+ }" j
能从ES分化出PGC来，这个更是很多人已经实践过的事情，科研需要一种脚踏实地的奉献精神，还要有开拓精神，现在基本的东西还远没搞清楚，盲目去搞应用，肯定是会失败而终，当然基础是为将来的应用打基础的，PGC的研究远比ES要早，100多年了，结果现在比研究了30来年的ES要落后许多，如和形成，如何迁移，如何扩增，如何风化每一步都有很多事情需要去做，特别是in vivo的东西。Anne McLaren，Brigid Hogan，Azim Surani，Wolf Reik， Ruth Lehmann，Haifan Lin, Chris Wylie，Mitinori Saitou，Yasuhisa Matsui等等还是做了不少东西，特别是Surani A.的东西蛮有意思的, 已过逝的老太太McLaren A.是最值得尊敬的和学习的。
作者: ppcl2    时间: 2010-4-8 10:16

看了一下你说的那几个人，国内做生殖细胞，以后估计是王海滨的天下，其他人跟他比顶多算灌水专家。
作者: ellapan    时间: 2010-4-8 15:05

回复 6# ppcl2
3 a! K# ]. C& p5 T- M6 L) @8 \5 ^: T0 L$ J0 I0 M. m

7 M, W# V$ o  f9 E    真的假的 是夏国良门下的那个王海滨？他还只是新人 虽然成绩不错可是我看也没达到独领风骚的境界呀
作者: ppcl2    时间: 2010-4-9 00:49

恩，就是夏国良门下的那个王海滨，胖小子虽然还是新人，但人家跟老夏比已算青出于蓝胜于蓝了，这老夏自己也承认的，其他几个就目前的业绩就比不过他了，他是实打实在国外名牌大学拿过tenure track AP的，独立后自己也已经发过高水平论文，现在有安民照着，以后大概其能行。动物所有个遭Chris挤兑的千人，要全职回去的话，水平十分了得。
作者: chenkang91    时间: 2016-2-24 23:45

您好，学生我刚开始着手做ES分化到PGC方面的实验。参照的是2011-Reconstitution of the mouse germ cell specification pathway in culture by pluripotent stem cells.其中涉及到ES细胞无feeder培养的问题。我现在的问题是没有确定的Qi-Long Ying的N2B27培养基的配方，现在实验室是否有具体的ES无feeder培养方法？
作者: 细胞海洋    时间: 2016-2-25 14:56

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